ELISA試劑盒的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。

      此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA試劑盒可用于測定抗原，也可用于測定抗體。然而，故加強各個環節的質量保證才能充分發揮其方法學的優點。

操作注意事項：

（1）試劑應按標簽說明儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄。

（2）實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存。

（3）不用的其它試劑應包裝好或蓋好。

（4）使用一次性的吸頭以免交叉污染。

（5）用干凈的塑料容器配置洗滌液。用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

（6）洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

（7）底物A應揮發避免長時間打開蓋。底物B對光敏感避免長時間暴露于光下。

（8）加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

（9）ELISA試劑盒按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。此外，（10）在加樣過程中，應避免產生氣泡，以免影響反應結果。若不慎產生氣泡，應輕輕晃動酶標板以去除。（11）讀取結果時，應使用專業的酶標儀，確保波長準確，避免人為誤差。讀取時間也需嚴格按照說明書執行，過早或過晚都可能影響結果的準確性。（12）每次實驗應設立陰性對照和陽性對照，以監控實驗過程的有效性，確保實驗數據的可靠性。（13）對于異常結果，應進行重復實驗驗證，避免單一實驗的偶然性導致的誤判。（14）實驗結束后，所有使用過的器材和試劑應按照生物安全規定妥善處理，防止環境污染和交叉感染。遵循以上操作注意事項，不僅能確保ELISA試劑盒的準確性和靈敏度，還能有效延長其使用壽命，為科研和臨床診斷提供堅實的技術支持。