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免疫熒光技術(shù)的實驗步驟：

一、準備好試劑與儀器：

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實驗步驟

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。

2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。

4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
別 名 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9; Tnfrsf9; TNFRSF9; 4-1BB; 4 1BB; 4 1BB ligand receptor; Homolog of mouse 4 1BB; Receptor protein 4 1BB; T cell antigen 4 1BB homolog; T cell antigen ILA; Cd137; CDw137; CD 137; CD137 antigen; Induced by lymphocyte activation; ILA; Interleukin activated receptor homolog of mouse Ly63; Ly63; MGC2172; MGC114552; OTTHUMP00000044294; TNR9_HUMAN.

純化方法 affinity purified by Protein A

儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Soium zde

產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 

產(chǎn)品名稱	受體超家族成員9抗體0.1ml/100μg0.2ml/200μg
英文名稱	Anti-CD137
貨號	LZK64918

英文名稱 Anti-CD137

中文名稱 受體超家族成員9抗體

濃 度 1mg/1ml

規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg

抗體來源 Rabbit

克隆類型 polyclonal

交叉反應 Human, Mouse, Rat, Horse

產(chǎn)品類型 一抗

研究領域 細胞生物 免疫學 細胞凋亡 細胞膜受體 自然殺傷細胞 t-淋巴細胞

蛋白分子量 predicted molecular weight: 25kDa

性 狀 Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CD137

亞 型 IgG

抗體的制備過程：

1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物：常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量 時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用采血，家兔、山羊、綿羊可采用采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。聯(lián)祖保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

 

 

抗體分子標記技術(shù)：

（一）原理

當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

（二）準備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

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螺;純品型;標準品;有證書 1420048 訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.1g
N-(2-乙酰基)-2-亞氨基二乙酸，500g 進口/原裝 Potassium bromide 規(guī)格：光譜純SP

N-(2-乙酰氨基)-亞氨基二乙酸二鈉鹽，100g 進口/原裝 Potassium bicarbonate 規(guī)格：>99%,AR

N-(2-乙酰氨基)-亞氨基二乙酸二鈉鹽，25g 進口/原裝 Potassium acetate 規(guī)格：>99%,分子生物學級

2-氨基-2-甲基-1-丙醇，100ml 進口/原裝 Posaconazole-d4 規(guī)格：美國進口

2-氨基-2-甲基-1-丙醇，500ml 進口/原裝 Posaconazole 規(guī)格：>99%

受體超家族成員9抗體0.1ml/100μg0.2ml/200μg2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇，100g 進口/原裝 Posaconazole 規(guī)格：HPLC>98%,標準品"

2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇，25g 進口/原裝POPOP 規(guī)格：>98%

3-[N-（1，1-二甲基-2-羥乙基）]氨基-2-羥丙烷磺酸，100g 進口/原裝 Ponceau S 規(guī)格：BS

3-[N-（1，1-二甲基-2-羥乙基）]氨基-2-羥丙烷磺酸，25g 進口/原裝 Ponceau 2R 規(guī)格：BS