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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
MCA線粒體檸檬酸測試劑盒紫外分光光度法
  • 品牌:聯祖
  • 產地:國產
  • 型號:100管/96樣
  • 貨號:LZ-01581S
  • 發布日期: 2021-02-24
  • 更新日期: 2025-01-09
產品詳請
產地 國產
品牌 聯祖
貨號 LZ-01581S
用途 公司產品僅用于科研
英文名稱
包裝規格 100管/96樣
純度 %
CAS編號
別名 線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒
分子式
是否進口



【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

MCA線粒體檸檬酸測試劑盒紫外分光光度法

100管/96樣

微量法

LZ-01581S

商品介紹:

測定意義
乙酰輔酶A廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中。是生物體能源物質代謝過程中產生的一種重要的中間代謝產物。在體內能源物質代謝中是一個樞紐性的物質。糖、脂肪、蛋白質三大營養物質通過乙酰輔酶A匯聚成一條共同的代謝通路-三羧酸循環和氧化磷酸化,經過這條通路氧化生成二氧化碳和水,釋放能量用于ATP合成。此外,乙酰輔酶A是合成脂肪酸,酮體,膽固醇及其衍生物等生理活性物質的前體物質。

測定原理

蘋果酸脫氫酶可催化蘋果酸和NAD生成草酰乙酸和NADH。檸檬酸合酶可催化乙酰輔酶A和草酰乙酸生成檸檬酸和輔酶A。利用蘋果酸脫氫酶和檸檬酸合酶的偶聯反應,乙酰輔酶A含量和NADH的生成速率成正比,340nm下吸光值的上升速率反應了乙酰輔酶A含量的高低。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

實驗通用規則:
1、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
2、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
3、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
4、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5、實驗時,要使底物避光保存。
6、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。
8、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
10、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
小鼠瘤細胞;P388D1(IL-1)噻乙酸,英文名或英文縮寫:2-Aminothiazol-4-acetic acid,級別:USP級,1603u/mg,規格:10KU

H9c2細胞,大鼠心肌細胞 人細胞,HepG2/2-15細胞 CL-0128JeKo-1(人套細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×23-(癸基二基銨)炳烷-1-磺醋內鹽 3-(Dqcyldimqthylczcniumyl)propcnq-1-sulfonctq 12163-36-7

二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-GLYCEROL甘油蛋白組學級無色至幾乎無色粘稠液體RTsigma

CD38 Others Human 人 CD38 人細胞裂解液 (陽性對照) 磺丁基-β-環糊精,英文名或英文縮寫:Sulfobutyl-β-Cyclodextrin,級別:高,98%,規格:500U

破骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3240-34-4二乙酰氧基本(Diacetoxyiodo)benzene
SNU-739人細胞 SNU-739 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS微量可調移液器P2005克

IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽)5-溴代水楊醋 5-Bromosclicylic ccid 89-22-4

NCI-H226(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 VERO C1008 (E6)(非洲綠猴腎細胞)L-半胱酸鹽酸鹽10克RT,避光

NRK-52E,大鼠腎細胞EDTA,3NaN,N'-1,2-基雙[N-(羧甲基)-甘酸]三鈉鹽5克GR,99.5%

CD63 Others Sus scrofa (Pig) 野豬 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人細胞裂解液 (陽性對照) L-xy7noxyproline 1g/5g/10g/25g/100g原裝 Aldrich H54409
兔間變表皮鱗株;VX21丙基-β-D-吡喃半乳糖苷ALLYL-BETA-D-GALACTOPYRANOSIDE質量規格:>98%,BR

人上皮細胞(HPEpiC)(5×105)2-氨基環乙醇2-Aminocyclohexanol  質量規格:>98%,日本原裝進口

CL-0131KB(人口腔表皮樣癌細胞)5×106cells/瓶×2Y-27632.2HClY27632質量規格:>98%,ROCK1(p160ROCK) 選擇性抑制劑

人非小細胞細胞;NCI-H23 大鼠視網膜muller細胞 100mL靈芝酸A(標準品)Ganoderic acid A質量規格:HPLC≥95%,標準品

A549/DDP 肺腺癌/順鉑耐藥株蝙蝠葛蘇林堿(標準品)Daurisoline質量規格:≥96%,標準品
MCA線粒體檸檬酸測試劑盒紫外分光光度法CM-H049人直腸平滑肌細胞完全培養基100mLA.C.Eformide毛細管電泳級甲先胺測序級100ML1975-2-7Frozen

ACVRL1 Others Cynomolgus 食蟹猴 ALK-1 / ACVRL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 三羌基安基烷言醋鹽 2-cmino-2-(xy7noxymqthyl)-1,3-propcnqdiol xy7nochloridq 1182-23-1

人星形膠質細胞HAPRE-STAINEDPROTEINMARKER,LOW蛋白Marker電泳級0.5MLFrozen

HL60細胞,人原髓細胞細胞 大鼠瘤細胞,IR983F細胞 角質細胞培養基KM乙酸-α-奈酯25克

MDA-MB-436(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2(熒光染料)
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。


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