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免疫熒光技術(shù)的實驗步驟：

一、準備好試劑與儀器：

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實驗步驟

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。

2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。

4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
別    名  Chromosome 1 open reading frame 177; FLJ40201; Hypothetical protein LOC163747; Uncharacterized protein C1orf177; CA177_HUMAN.

純化方法  affinity purified by Protein A

儲 存 液  Preservative: 15mM Soium zde, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

產(chǎn)品應用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500 

產(chǎn)品名稱	1號染色體開放閱讀框177抗體0.2ml/200μg
英文名稱	Anti-C1orf177
貨號	LZK64254

英文名稱  Anti-C1orf177

中文名稱  1號染色體開放閱讀框177抗體

濃    度  1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源  Rabbit

克隆類型  polyclonal

交叉反應  Human, Mouse, Rat

產(chǎn)品類型  一抗

研究領域   細胞生物 免疫學 神經(jīng)生物學

蛋白分子量  predicted molecular weight: 48kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human C1orf177

亞    型  IgG

抗體的制備過程：

1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物：常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量 時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用采血，家兔、山羊、綿羊可采用采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。聯(lián)祖保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

 

 

抗體分子標記技術(shù)：

（一）原理

當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

（二）準備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

二標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 57556

二二月桂酯標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 22788198

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二單月桂酯II型標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 37321623

沒食子酯標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 121799

羥酯標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 94133

基氧嘧啶標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 51525

前列A1標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 14152284

前列B1標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 13345512

蛋白A標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 

UVM培養(yǎng)基 訂購|咨詢 進口/國產(chǎn) 100克

LM137瓊脂 訂購|咨詢 進口/國產(chǎn) 500克

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人白介素2受體(IL2R)ELISA試劑盒 規(guī)格：96T/48T    

人白介素3(IL3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T    

人白介素4(IL4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T    

人白介素6(IL6)ELISA試劑盒 規(guī)格：96T/48T    

人白介素8(IL8/CXCL8)ELISA試劑盒 規(guī)格：96T/48T    

人白介素9(IL9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T    

人白介素受體相關激酶(IRAK)ELISA試劑盒 規(guī)格：96T/48T    小鼠阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒   規(guī)格：96T/48T    

小鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒   規(guī)格：96T/48T    

小鼠γ干擾素(IFNγ)ELISA試劑盒   規(guī)格：96T/48T    

1號染色體開放閱讀框177抗體0.2ml/200μg小鼠γ基(GABA)ELISA試劑盒   規(guī)格：96T/48T             

大鼠酰輔酶A羧酶(pACCase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T    

大鼠肌3激酶(PI3K)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T    

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大鼠氧還蛋白還原酶(TrxR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T    

大鼠還原蛋白(Trx)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T    

大鼠標志物CA125ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T    

大鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T    小鼠神經(jīng)降壓肽（）ELISA試劑盒   規(guī)格：96T/48T    

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小鼠上皮中性粒細胞活肽78(ENA78/CXCL5)ELISA試劑盒   規(guī)格：96T/48T