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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞株；IgM-7

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性: 懸浮生長(zhǎng)

特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低dmso濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

金黃節(jié)桿菌Dayecrystal A分子式：C20H32O3

硝基癒瘡木膠節(jié)桿菌6α,16,18-Trihydroxycleroda-3,13-dien-15,16-olide分子式：C20H30O5

死谷芽孢桿菌Prionitin分子式：C21H26O2

托拉氏假單孢菌Trichokaurin分子式：C24H34O7

解淀粉類芽孢桿菌Acetylsventenic acid分子式：C22H32O4

寡養(yǎng)單胞菌16-Hydroxy-2-oxocleroda-3,13-dien-15,16-olide分子式：C20H28O4

泛菌12α-Hydroxygrandiflorenic acid分子式：C20H28O3

氣微菌Sugiol分子式：C20H28O2

茄科雷爾氏菌14-Deoxycoleon U分子式：C20H26O4

馬鏈球菌獸瘟亞種(馬鏈球菌動(dòng)物傳染病亞種)Tetrachyrin分子式：C20H28O2

冷解糖芽孢桿菌ent-3β-Angeloyloxykaur-16-en-19-oic acid分子式：C25H36O4

食瓊脂類芽孢桿菌Andropanoside分子式：C26H40O9

埃特里根瘤菌Uncinatone分子式：C20H22O4

金黑小單胞菌2β-Hydroxykolavelool分子式：C20H34O2

苜蓿中華根瘤菌2-Oxokolavelool分子式：C20H32O2

木糖氧化產(chǎn)堿桿菌13-Epijhanol分子式：C20H34O2

沙地芽孢桿菌Vibsanin C分子式：C25H36O5

解酪蛋白巨大球菌3α-Angeloyloxypterokaurene L3分子式：C25H36O5

遲鈍愛得華氏菌Dodonolide分子式：C20H24O3

脫色希瓦氏菌9α,13α-Epidioxyabiet-8(14)-en-18-oic acid分子式：C20H30O4
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；IgM-7供應(yīng)商氫溴酸后馬托品 5- nitro furfural two acetate 規(guī)格：100mg

5-硝基糠醛二乙酸酯 10- methoxy -4- (1- methyl piperidine based -4- 規(guī)格：100mg

10-甲氧基-4-（1-甲基-4-哌啶基 Clioquinol system suitability test control products 規(guī)格：50mg

氯碘羥喹系統(tǒng)適用性試驗(yàn)對(duì)照品 Clofazimine 規(guī)格：20mg

氯法齊明 Azathioprine impurities 規(guī)格：50mg

硫唑嘌呤雜質(zhì) Sodium nitroprusside 規(guī)格：50mg

硝普鈉 Two oxygen six ring 規(guī)格：200mg

二氧六環(huán) Two oxygen six ring 規(guī)格：200mg

消旋山莨菪堿雜質(zhì)Ⅰ The impurity of Raceanisodamine 規(guī)格：20mg

鹽酸米托蒽醌（暫行） Mitoxantrone Hydrochloride (Provisional) 規(guī)格：400mg

烯化合物(鹽酸地芬尼多雜質(zhì)) Allyl compounds (Finney hydrochloride multi impurity) 規(guī)格：100mg