- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZX8261
- 發(fā)布日期: 2020-12-10
- 更新日期: 2025-01-13
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZX8261 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | 詳見說明書 |
細(xì)胞形態(tài) | 淋巴母細(xì)胞樣 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來(lái)源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | A型 |
品系 | 詳見說明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 懸浮生長(zhǎng) |
物種來(lái)源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 株 |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
特別聲明:本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品,嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。
產(chǎn)品名稱 | 雜交瘤細(xì)胞株;WV-A-01規(guī)格 |
生長(zhǎng)特性 | 懸浮生長(zhǎng) |
貨號(hào) | LZX8261 |
細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞株;WV-A-01
形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 懸浮生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
傳代方法:
產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。
(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。
3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。
注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
細(xì)胞核提取試劑盒復(fù)蘇細(xì)胞步驟:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。*天換液并檢查細(xì)胞密度。細(xì)胞傳代步驟:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Hoechst33342熒光染料.復(fù)蘇細(xì)胞步驟:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。*天換液并檢查細(xì)胞密度。細(xì)胞傳代步驟:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Hoechst33342染色液(即用型)10ug/ml培養(yǎng)條件:DMEM(高糖)+10%FBS傳代方法:1:3~1:6傳代,2-3d換液
DiI細(xì)胞膜橙色熒光探針特征特性:由MCF7細(xì)胞經(jīng)順鉑耐藥篩選得到的細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
Hoechst33342染色液(1mg/mL).特征特性:與 L Wnt-3A 和 L Wnt-5A 細(xì)胞系是親本細(xì)胞系細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒Roche細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。培養(yǎng)條件:RPMI-1640(含25 mM HEPES)+10%FBS
Hoechst33258熒光染料特征特性:這是P3X63Ag8(ATCCTIB-9)的一個(gè)不分泌克隆。Kappa鏈合成了但不分泌。能抗0.1mM8-氮雜鳥嘌呤但不能在HAT培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。據(jù)報(bào)道它是由于缺失了3-酮類固醇還原酶活性的膽固醇營(yíng)養(yǎng)缺陷型。檢測(cè)表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
脂質(zhì)體2000Invitrogen原裝特征特性:貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
紅細(xì)胞保存液(阿氏液)特征特性:HCT-8細(xì)胞經(jīng)氟尿嘧啶篩選得到的細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
Hoechst33258染色液(即用型)10ug/ml培養(yǎng)條件:RPMI-1640(含25 mM HEPES) +10%FBS傳代方法:1:3~1:6傳代,2-3d換液
1%組織細(xì)胞固定液特征特性:細(xì)胞增殖很緩慢細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
脂質(zhì)體3000Invitrogen原裝特征特性:MCF-7細(xì)胞經(jīng)阿霉素篩選得到的耐藥株細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
固定液(2%/2.5%)特征特性:第三代細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
AdenineSulfate腺嘌呤硫酸鹽二水合物特征特性:檢測(cè)到肺表面活性劑蛋白B和C的表達(dá),在裸鼠中歷時(shí)6-9個(gè)月可成瘤,細(xì)胞分泌的磷脂響應(yīng)于佛波醇酯和ATP而不是響應(yīng)于毛喉素。細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
細(xì)胞生物學(xué)>細(xì)胞分離液特征特性:通過轉(zhuǎn)入SV40基因使細(xì)胞永生化,表達(dá)細(xì)胞角蛋白8和18及波形蛋白,該細(xì)胞在裸鼠中沒有致瘤性細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
人外周巴細(xì)胞分離液特征特性:在裸鼠中可成瘤,p53基因突變細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
人外周巴細(xì)胞分離液(FICOLL配制)特征特性:細(xì)胞角蛋白陽(yáng)性;表達(dá)CEA、堿性磷酸酶,在裸鼠中能夠成瘤細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
小鼠外周巴細(xì)胞分離液試劑盒特征特性:檢測(cè)病毒Ⅰ型(HIV-1)對(duì)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
小鼠脾臟淋巴細(xì)胞分離液試劑盒特征特性:在HFF-1的基礎(chǔ)上轉(zhuǎn)入了SV 40 大T抗原細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
FicollPlus1.077特征特性:細(xì)胞保持近梭形、橢圓形、三角形,表面有豐富的微絨毛,細(xì)胞呈鋪路石樣鑲嵌排列;細(xì)胞表達(dá)CK3、CK19、CK14、波形蛋白(Vimentin)、微絲蛋白(F-actin),微管蛋白(β-tubilin),細(xì)胞增殖細(xì)胞核抗原(PCNA),β1-integrin等細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
雜交瘤細(xì)胞株;WV-A-01規(guī)格BT-549(管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M093胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LoVo
EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細(xì)胞;B95-8
CD40LG Others Rat CD40L / CD154 / TNFSF5 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
MEG-01細(xì)胞,成巨核細(xì)胞細(xì)胞 正常Leydig細(xì)胞,TM3細(xì)胞 間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)添加物MSCGS
NCI-H23(非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
小腸隱窩上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
OPCML *樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細(xì)胞粘附分子樣蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
OPG 骨保護(hù)蛋白/護(hù)骨素抗體規(guī)格: 0.1ml
RANK 核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體抗體規(guī)格: 0.2ml
OPGL/ODF 骨保護(hù)蛋白配體抗體(破骨細(xì)胞分化因子)規(guī)格: 0.1ml
OPN 骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)規(guī)格: 0.1ml