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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞株；7P1-7

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長特性: 懸浮生長

特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

Medium199,PowderGibco細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。培養(yǎng)條件：準(zhǔn)備Keratinocyte Serum Free Medium培養(yǎng)基(Keratinocyte Serum Free Medium (K-SFM):GIBCO,貨號17005-042, Kit中含有兩種添加因子：牛腦脊液提取物（BPE）,表皮生長因子（EGF），培養(yǎng)細(xì)胞時添加：0.05 mg/ml BPE，5 ng/ml EGF，10 ng/ml cholera toxi。注意，添加好的培養(yǎng)基不能過濾。（另外，有文獻(xiàn)使用DMEM/F12培養(yǎng)基，添加10%胎牛血清）

MCCOY'S5A，withL-Glutamine生長特性：貼壁生長特征特性：該細(xì)胞源于一位51歲患有非小細(xì)胞黑人男性患者的前的組織，表達(dá)C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erb B、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras、N-ras RNAs；該細(xì)胞攜帶K-ras 12突變；p53基因246位密碼子突變ATC→ATG；表達(dá)PDGF A和B鏈的異源mRNA；表達(dá)TGFα、TGFβ和EGFR；角蛋白 5、8和18陽性，波形蛋白陽性，神經(jīng)絲蛋白陰性，左旋多巴脫氫酶陰性；據(jù)報(bào)道，在軟瓊脂中該細(xì)胞形成克隆的效率為9.7%。

B-27?Serum-FreeSupplement(50X),Liquid特征特性：采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞野生型AβPPTS1 基因，所得細(xì)胞表達(dá)野生型AβPPTS1蛋白細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。

MCCOY'S5A，withL-Glutamine，with25mMHEPES生長特性：貼壁生長特征特性：該細(xì)胞系源自于一名19歲車禍罹難的健康男性的視網(wǎng)膜組織，由Amy Aotaki-Keen建系于1986年。該細(xì)胞系表達(dá)視網(wǎng)膜色素細(xì)胞特有的分子標(biāo)記如胞內(nèi)視黃醛結(jié)合蛋白和PRE-65。

胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基TSB培養(yǎng)條件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃細(xì)胞凍存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

半固體瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)條件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃細(xì)胞凍存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

懸浮培養(yǎng)基（SM,2%）培養(yǎng)條件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃細(xì)胞凍存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

Ham'sF-12NutrientMix,powderGibco培養(yǎng)條件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃細(xì)胞凍存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

YPD液體培養(yǎng)基特征特性：細(xì)胞耐藥分步誘導(dǎo) 待細(xì)胞生長穩(wěn)定后，開始倍增藥物誘導(dǎo)劑量，依次為0.125μg/mL、0.25μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、8μg/mL、16μg/mL，每個劑量保持培養(yǎng)20天左右。至第8個月末可誘導(dǎo)出對TMZ具有5-8倍耐藥的細(xì)胞系，并命名為U251 MG/TMZ。細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。

阪崎桿菌顯色培養(yǎng)基生長特性：貼壁細(xì)胞細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。

細(xì)胞生物學(xué)>平衡鹽溶液生長特性：貼壁培養(yǎng)特征特性：主動脈內(nèi)皮細(xì)胞（aortic endothelial cells）組成了主動脈內(nèi)壁，并持續(xù)受到血流剪切應(yīng)力的影響。內(nèi)皮細(xì)胞在切應(yīng)力的作用下，分泌不同的內(nèi)皮因子并進(jìn)而影響收縮和生長。主動脈內(nèi)皮細(xì)胞也調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附分子的表達(dá)來控制和精確調(diào)節(jié)反應(yīng)和組織纖維化。體外培養(yǎng)的原代主動脈內(nèi)皮細(xì)胞可有效地幫助研究者研究內(nèi)皮功能失調(diào)的機(jī)理，動脈粥樣化等疾病的機(jī)理以及發(fā)展新的方法。

10×PBS緩沖液(pH7.2-7.4)生長特性：懸浮生長細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。

D-Hanks(不含鈣鎂,不含酚紅)培養(yǎng)條件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃細(xì)胞凍存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

D-PBS緩沖液(不含鈣鎂和酚紅)特征特性：該細(xì)胞是從一名69歲的白人患者的中分離建立的。該細(xì)胞保留了多個分化乳腺上皮的特性，包括：能通過胞質(zhì)雌激素受體加工雌二醇并能形成隆突結(jié)構(gòu)（domes）；該細(xì)胞表達(dá)WNT7B癌基因；TNF-α可以抑制MCF-7細(xì)胞的生長；抗雌激素處理能調(diào)節(jié)細(xì)胞胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白（IGFBP）的分泌。細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。

Hanks，含鈣鎂，不含酚紅（HBSS）培養(yǎng)條件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃細(xì)胞凍存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

D-Hanks，不含鈣鎂，含酚紅（HBSS）細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。培養(yǎng)條件：RPMI-1640培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。

臺氏液生長特性：貼壁生長細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。

10xD-Hanks，不含鈣鎂，不含酚紅（HBSS）培養(yǎng)條件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃細(xì)胞凍存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

EBSS，含鈣鎂，不含酚紅培養(yǎng)條件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃細(xì)胞凍存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

EBSS含鈣鎂含酚紅培養(yǎng)條件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃細(xì)胞凍存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
雜交瘤細(xì)胞株；7P1-7規(guī)格PDCD1 Others Human  PD1 / PDCD1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CM-R125牙細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

FAIM3 Others Human  FAIM3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

Hep G2細(xì)胞，細(xì)胞 腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞,SW-13細(xì)胞 內(nèi)根鞘細(xì)胞HHIRSC

豬腎細(xì)胞;PK-15

小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基MM

PDI  蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶抗體規(guī)格： 0.2ml

PDK1/PDPK1  3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體規(guī)格： 0.2ml

Phospho-PDK1 (Ser241)  磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1規(guī)格： 0.1ml

Phospho-PDK1 (Tyr373/376)  磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體規(guī)格： 0.1ml

Pdk4  丙酮酸脫氫酶激酶4抗體規(guī)格： 0.1ml