|
| 產地 | 進口、國產 |
| 保存條件 | 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS |
| 品牌 | 聯祖 |
| 貨號 | LZX8255 |
| 用途 | 公司產品僅用于科研 |
| 組織來源 | 詳見說明書 |
| 細胞形態 | 淋巴母細胞樣 |
| 是否是腫瘤細胞 | 否 |
| CAS編號 | |
| 保質期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | A型 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態 | 懸浮生長 |
| 物種來源 | 詳見說明書 |
| 包裝規格 | 株 |
| 純度 | % |
| 是否進口 | 是 |
特別聲明：本產品及我公司所售其他產品均為科研類試劑產品，嚴禁用于藥物、醫療及其他非科研用途。
產品名稱 | 雜交瘤細胞株；K3L25供應商 |
生長特性 | 懸浮生長 |
貨號 | LZX8255 |
細胞名稱 雜交瘤細胞株；K3L25
形態特性: 淋巴母細胞樣
生長特性: 懸浮生長
特征特性: 該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。
培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
傳代方法：
產品僅用于科研收到細胞后，取出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，吸出培養液，僅留下10ml培養液在瓶內繼續培養。。
（二）如果細胞已長滿，即可進行傳代培養。具體步驟如下：
1. 棄去培養液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱，然后又將培養瓶倒轉大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養培養瓶，細胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml完全培養基，吸出，分到新的培養瓶中。一傳二。
注意：傳代后一半用我們的培養基，一半用你們的，以免細胞不適應而造成生長不好。
注意事項：
1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。
操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）產品僅用于科研觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
綿羊血清（無菌過濾）生長特性：貼壁培養特征特性：廣譜角蛋白（PCK）或細胞角蛋白-19（CK-19）免疫熒光染色為陽性。經鑒定細胞純度高于90%
脫纖維馬血（無菌）復蘇細胞步驟：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。*天換液并檢查細胞密度。細胞傳代步驟：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
雞血清（無菌過濾）生長特性：貼壁培養特征特性：結蛋白（Desmin)或者平滑肌肌動蛋白（α-SMA）免疫熒光染色為陽性
昆蟲SF9細胞專用血清生長特性：貼壁培養特征特性：廣譜角蛋白（PCK）或細胞角蛋白-19（CK-19）免疫熒光染色為陽性。經鑒定細胞純度高于90%
四環素調控系統專用胎牛血清生長特性：貼壁培養特征特性：假性因子（vWF）免疫熒光染色為陽性
抗凝綿羊血（無菌）生長特性：貼壁培養特征特性：結蛋白（Desmin)或者平滑肌肌動蛋白（α-SMA）免疫熒光染色為陽性
細胞融合專用胎牛血清特征特性：抗原表達: CD31 陽性 [PubMed:1315100] 產物: 八因子 [PubMed: 11315100]; 整合唾液酸蛋白 (BSP) [PubMed11315100]; biglyan [PubMed: 11315100]; decorrin [PubMed:1315100]; villin 2 (ezrin) [PubMed: 11325848]. 骨唾液酸蛋白, biglyan, decorrin, 和 osteopontin 的表達顯示其骨家族細胞特性。 在本庫通過支原體檢測。細胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
抗凝新生牛血（無菌）生長特性：貼壁培養特征特性：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為陽性
綿羊紅細胞6%（無菌）生長特性：貼壁培養特征特性：假性因子（vWF）免疫熒光染色為陽性該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶SV40基因。
VERO細胞專用血清生長特性：貼壁培養特征特性：細胞角蛋白-8（CK-8）免疫熒光染色為陽性，經鑒定細胞純度高于90%
抗凝山羊血（無菌）生長特性：貼壁培養特征特性：CD44免疫熒光染色為陽性。細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶SV40基因
脫纖維新生牛血（無菌）細胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。培養條件：準備DMEM培養基；優質胎牛血清，15%；L-Glu，1%；NEAA，1%；丙酮酸鈉，1%； 添加1uL/mLβ-Me和0.1uL/mLLIF； 雙抗，1%；培養瓶用0.1%明膠包被，或者使用昆明白MEF作為飼養層細胞。
抗凝驢血（無菌）生長特性：貼壁生長細胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
二倍體細胞專用胎牛血清復蘇細胞步驟：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。*天換液并檢查細胞密度。細胞傳代步驟：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
巴比西鼠血清（無菌過濾）生長特性：貼壁培養特征特性：骨骼肌細胞是人和動物體內*的細胞之一，它們是由成肌細胞(Myoblasts)融合而來的多核細胞，故骨骼肌的形成是一個非常復雜的過程，并需要多種細胞信號通路的參與，包括phosphatidylinositol 3-kinase，calcineurin，STAT3和MAPK等。原代骨骼肌細胞的培養是研究細胞分化過程的有效的模型。
γ照射處理胎牛血清培養條件：DMEM培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗1%傳代方法：1:2到1:5的比例
狗血清（無菌過濾）復蘇細胞步驟：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。*天換液并檢查細胞密度。細胞傳代步驟：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
脫纖維驢血（無菌）生長特性：貼壁特征特性：This cell line may be used for both in vitro and in vivo studies of a rat brain tumor. It grows well in cellculture and provides a simple,reproducible glioma model when inoculated into the brains ofsyngeneic rats.The RG2 and F98 (ATCC CRL-2397) gliomas can be used as rat brain tumor models inexperimental neuro-oncology.
細胞生物學>細胞培養基復蘇細胞步驟：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。*天換液并檢查細胞密度。細胞傳代步驟：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
DMEM(H)(含雙抗，不含丙酮酸鈉)復蘇細胞步驟：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。*天換液并檢查細胞密度。細胞傳代步驟：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
雜交瘤細胞株；K3L25供應商CD4 Others Human CD4 / LEU3 細胞裂解液 (陽性對照)
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7
NCF2 Others Human NCF-2 / NCF2 / P67phox 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
獼猴皮膚細胞;MMS4 軟組織細胞，TE 115.T細胞 Eca-109(細胞)
小細胞細胞;NCI-H209
小氣道上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
Phospho-HP1(Tyr43) 異染色質蛋白1磷酸化抗體（果蠅）規格： 1ml
HPL/PL 胎盤泌乳素抗體規格： 0.2ml
HPR1/p84 核基質p84蛋白抗體規格： 0.2ml
HPV 類狀瘤病毒抗體規格： 0.2ml
HPV16-E6 類狀瘤病毒16抗體規格： 0.1ml
