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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細胞不適應而造成生長不好。

細胞名稱 人外周淋巴細胞；U266B1

形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣

生長特性: 懸浮生長

特征特性: 該細胞系是由N.K.Nilsson于1970年從一名53歲患有男性的外周血中分離建立的。免疫學研究表明，該細胞和體內(nèi)細胞表達相同的免疫球蛋白。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況: C8

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項：

1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。

4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。

7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

神經(jīng)母細胞瘤蛋白PHOX2B抗體英文縮寫：PHOX2BC15H12O4≥98%

細胞周期蛋白依賴性激酶5激活因子1抗體英文縮寫：p35C21H22O9≥98%

肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3復合體亞基5抗體英文縮寫：p16 ARCC34H46O18≥98%

浦肯野細胞萎縮相關(guān)蛋白1抗體英文縮寫：Puratrophin 1C44H70O17≥98%

凋亡誘導受體PLEKHG5抗體英文縮寫：PLEKHG5C27H22O12≥98%

蛋白質(zhì)磷酸酶2A-B55抗體英文縮寫：PPP2R2B/PP2A-B55C36H30O16≥98%

棕櫚酰蛋白水解酶2抗體英文縮寫：PPT2C14H19NO8≥98%

多谷氨酰胺結(jié)合蛋白1抗體英文縮寫：PQBP1C20H23NO4≥96%

豬藍耳病病毒抗體英文縮寫：PRRSVC20H28O8≥98%

對氧磷酶3抗體英文縮寫：PON3C20H24N2O2≥95%

蛋白質(zhì)精氨酸亞型2抗體英文縮寫：PADI2C11H16O5≥95%

磷酸轉(zhuǎn)移酶2抗體英文縮寫：PCYT2C16H24O10≥98%

磷脂酰肌醇結(jié)合網(wǎng)格蛋白組裝蛋白抗體英文縮寫：PICALM/C17H26O10≥98%

絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶1調(diào)節(jié)亞基10抗體英文縮寫：PPP1R10C27H34O11≥95%

細胞色素氧化酶裝配因子PET112抗體英文縮寫：PET112LC22H30O6≥98%
人外周淋巴細胞；U266B1價格H-Phe-OEt.HCl　L-苯丙氨酸乙酯鹽酸鹽　質(zhì)量規(guī)格：≥98%,細胞培養(yǎng)級

Glycineethylesterhydrochloride　甘氨酸乙酯鹽酸鹽　質(zhì)量規(guī)格：≥98%,選擇性的PARP1/2抑制劑

L-Methionineethylesterhydrochloride　L-蛋氨酸乙酯鹽酸鹽;L-甲硫氨酸乙酯鹽酸鹽　質(zhì)量規(guī)格：≥98%；美國進口

L-Tyrosineethylesterhydrochloride　L-酪氨酸乙酯鹽酸鹽　質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%

L-Asparticacidβ-benzylester　L-天冬氨酸-β-芐酯/L-天冬氨酸-4-芐酯　質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%

L-Glutamicacidγ-benzylester　L-谷氨酸-γ-芐酯　質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%(GC)

L-Phenylalaninebenzylesterhydrochloride　L-苯丙氨酸芐酯鹽酸鹽　質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%(HPLC),分析標準品

L-Prolinebenzylesterhydrochloride　L-脯氨酸芐酯鹽酸鹽　質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%(T),進口標準品

L-ArginineL-glutamate　L-精氨酸-L-谷氨酸鹽　質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%,BR

L-ArginineAKG2:1　L-精氨酸-α-酮戊二酸鹽（2:1）　質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%,BR,L構(gòu)型

S-Acetamidomethyl-L-cysteinehydrochloride　S-乙酰半胱氨酸鹽酸　質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%,標準品

O-tert-Butyl-L-threoninemethylesterhydrochloride　O-叔丁基-L-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽　質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%,標準品,L構(gòu)型

L-Alanineisopropylesterhydrochloride　L-丙氨酸異丙酯鹽酸鹽　質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%,標準品用于含量測定

MethylL-asparaginatemonohydrochloride　L-天冬酰胺甲酯鹽酸鹽　質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%,國產(chǎn)

L-Asparticaciddi-tert-butylesterhydrochloride　L-天冬氨酸二叔丁基酯鹽酸鹽　質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%相關(guān)物質(zhì)及對應異構(gòu)體均小于1%