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細(xì)胞名稱 鼠B細(xì)胞；6A8/6F10/1A6

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長特性: 懸浮生長

特征特性: 該細(xì)胞由華中科技大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院提交保藏，可用于相關(guān)的基礎(chǔ)研究。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況: C10

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

同源盒蛋白HOXB13抗體英文縮寫：PSGD/HOXB13C14H12O5≥96%

磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體英文縮寫：Phospho-PDPK1(Ser393)C10H16O8≥98%

磷酸化P63抑制基因抗體英文縮寫：Phospho-p63 (Ser160+Ser162)C20H34O4≥98%

磷酸化p21激活激酶4抗體英文縮寫：Phospho-PAK4(Ser99)C14H20O9≥95%

磷酸化P73抑制基因抗體英文縮寫：Phospho-p73(Tyr99)C15H22O9≥95%

磷酸化DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體英文縮寫：Phospho-p95 NBS1 (Ser343)C14H22O2≤90%

p53正向細(xì)胞凋亡調(diào)控因子抗體英文縮寫：PUMAC20H34O≥96.5%

磷脂酶C1樣蛋白抗體英文縮寫：PLDL1C22H30O5≥99%

和相關(guān)蛋白英文縮寫：Prostate and colon associated proteinC20H22N2O≥98%

重組蛋白G抗體英文縮寫：Protein GC20H22N2O2≥95%

磷脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體英文縮寫：PIK3CAC18H12O4≥98%

蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶抗體英文縮寫：PDIC28H42N4O6≥98%

足細(xì)胞特異蛋白抗體英文縮寫：PODXLC28H42N4O6≥98%

抑制基因抗體（野生型P53）英文縮寫：P53(wt-p53)C17H14O6≥98%

配對盒基因7抗體英文縮寫：PAX7C26H30O6≥95%
鼠B細(xì)胞；6A8/6F10/1A6說明書L-Cystinehydrochloride　L-胱氨酸鹽酸鹽　質(zhì)量規(guī)格：≥900μg/mg,USP33,BR

L-Cysteine　L-半胱氨酸　質(zhì)量規(guī)格：≥93%,美國進(jìn)口

L-Cysteine　L-半胱氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：≥930μg/mg,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

L-Cysteinehydrochloridemonohydrate　L-半胱氨酸鹽酸鹽，一水　質(zhì)量規(guī)格：≥95%

DL-Cysteine　DL-半胱氨酸　質(zhì)量規(guī)格：≥95%,BR

L-Histidine　L-組氨酸　質(zhì)量規(guī)格：≥95%,BR

L-Alanine　L-丙氨酸　質(zhì)量規(guī)格：≥95%,TechGrade

L-Tyrosine　L-酪氨酸　質(zhì)量規(guī)格：≥95%,進(jìn)口半硫酸鹽

L-Tyrosine　L-酪氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：≥95%,美國進(jìn)口

L-Glutamicacid　L-谷氨酸　質(zhì)量規(guī)格：≥95%,美國進(jìn)口

L-Glutamicacid　L-谷氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：≥96%，標(biāo)準(zhǔn)品

L-Glutamicacid　L-谷氨酸(sigma)　質(zhì)量規(guī)格：≥96%,美國進(jìn)口

DL-Glutamicacidmonohydrate　DL-谷氨酸　質(zhì)量規(guī)格：≥97%

Sarcosine　肌氨酸　質(zhì)量規(guī)格：≥97%

Glycyl-DL-leucine　甘氨酸-DL-亮氨酸　質(zhì)量規(guī)格：≥97%