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細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1022

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長特性: 懸浮生長

特征特性: 該細(xì)胞系來源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

傳代方法: 1:2傳代；5-6天一次

傳代情況: P3

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

神經(jīng)組織特異性F肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體英文縮寫：Neurabin 1C17H23NO3≥98%

胞內(nèi)活化的Notch1蛋白抗體英文縮寫：NOTCH1C9H8O2≥95%

神經(jīng)鈣傳感蛋白1抗體英文縮寫：NCS1C8H8O2≥95%

神經(jīng)元鈣結(jié)合相關(guān)蛋白EFCBP1抗體英文縮寫：NECAB1C9H8O3≥98%

膜相關(guān)蛋白樣蛋白NUMBL抗體英文縮寫：NUMBLC18H18O5≥95%

嘌呤霉素敏感性氨肽酶蛋白抗體英文縮寫：NPEPPSC17H16O2≥95%

N-乙基順丁烯二酰亞胺敏感融合蛋白抗體英文縮寫：NSFC41H66O12≥98%

NIPAL2蛋白抗體英文縮寫：NIPAL2C10H12O4≥97%

神經(jīng)營養(yǎng)因子HNT抗體英文縮寫：NeurotriminC9H16O6≥98#5%

軸突蛋白1β/Neurexin 1β抗體英文縮寫：Neurexin 1 betaC21H26N2O3≥95%

谷氨酸受體3A抗體英文縮寫：NMDAR3AC20H34O2≥95%

谷氨酸受體3B抗體英文縮寫：NR3BC24H28O7≥95%

谷氨酸受體3A+3B抗體英文縮寫：NMDAR3A + 3BC16H12N2O3≥95%

P53誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制蛋白α抗體英文縮寫：NME6C10H14O5≥97%

胞質(zhì)5'核苷酸酶1A抗體英文縮寫：NT5C1AC24H26O6≥98%
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1022供應(yīng)商4-Methylumbelliferyl-β-D-xylopyranosidePrintableReviews　4-甲基傘形酮-β-D-木糖苷　質(zhì)量規(guī)格：>99%,進(jìn)分

2-Deoxy-D-Ribose　2-脫氧-D-核糖　質(zhì)量規(guī)格：>99%,進(jìn)分

D-Galactose　D-半乳糖(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,進(jìn)分

D-Galactose　D-半乳糖　質(zhì)量規(guī)格：>99%,進(jìn)分,ER(雌激素受體)拮抗劑

Hydrazinedihydrochloride　鹽酸肼;雙鹽酸肼　質(zhì)量規(guī)格：>99%,進(jìn)分sigma

Hydroxyapatite　羥基磷灰石　質(zhì)量規(guī)格：>99%,進(jìn)口分包

HydroxyPropylMethylCellulose/HPMCK15M　羥丙基甲基纖維素(粘度11250-21000mPas)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

Hydroxypropylmethylcellulose　羥丙基甲基纖維素　質(zhì)量規(guī)格：>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

HPMC,hydroxypropylmethylcellulose　羥丙基甲基纖維素(30000mpa.s)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

HPMC,hydroxypropylmethylcellulose　羥丙基甲基纖維素（4000mpas）　質(zhì)量規(guī)格：>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

D-(+)-Maltosemonohydrate　麥芽糖;淀粉糖　質(zhì)量規(guī)格：>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

ONX0914;PR957　ONX-0914(PR-957)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

N-Nonanoyl-N-methylglucamine　N-壬酰基-N-甲基葡萄糖胺(MEGA9)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,粒徑20nm

Methylcellulose　甲基纖維素(100000mPa.s)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,美國進(jìn)口

Methylcellulose,middleviscosity　甲基纖維素(4000mPa.s)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,美國進(jìn)口