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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細胞不適應而造成生長不好。

細胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞；KMY0922

形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣

生長特性: 懸浮生長

特征特性: 該細胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

傳代方法: 1:2傳代；5-6天一次

傳代情況: P2

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項：

1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。

4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。

7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

YM-201636YM201636質(zhì)量規(guī)格：>98%,PIKfyve抑制劑

Z-Ala-Ala-Leu-pNAZ-Ala-Ala-Leu-pNA質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

Z-Arg(Mtr)-OH·CHAZ-Arg(Mtr)-OH·CHA質(zhì)量規(guī)格：0.98

Z-L-酪氨酸甲酯Z-Tyr-OMe質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Zosuquidar；LY335979LY-335979質(zhì)量規(guī)格：>98%

ZSTK474ZSTK474；ZSTK-474質(zhì)量規(guī)格：>98%，I型PI3K亞型抑制劑

α-Apo-土霉素α-Apo-oxytetracycline質(zhì)量規(guī)格：美國進口

α-D-葡萄糖-1-磷酸-二鈉(>99.0%,BR)alpha-D-Glucose-1-phosphate,salt,

α－常春藤皂苷（標準品）α-hederin質(zhì)量規(guī)格：供含量測定用

α-促黑激素,黑素皮質(zhì)素α-MSH質(zhì)量規(guī)格：>95%

α-促黑激素α-MSH質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

α-倒捻子素(標準品)α-mangostin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品

α-淀粉酶α-Amylase質(zhì)量規(guī)格：BR，4000u/g

α-環(huán)糊精α-Cyclodextrin質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

α-甲基-L-苯丙氨酸α-Methyl-L-phenylalanine質(zhì)量規(guī)格：98%,BR,一水物
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞；KMY0922供應商Isoluminol　異魯米諾(>98.0%(HPLC)(T))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,CP

Bis[3,4,6-trichloro-2-(pentyloxycarbonyl)phenyl]Oxalate　草酸雙[2,4,5-三氯-6-(戊氧羰基)苯基]酯(>98.0%(HPLC))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,CP,AR

Disodium8-Amino-1,3,6-naphthalene3sulfonateHydrate　8-氨基-1,3,6-萘三磺酸二鈉鹽水合物(>99.0%(HPLC)(T))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,CXCR4趨化因子受體拮抗劑

Coumarin102　香豆素102(>97.0%(HPLC)(N))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP

Coumarin314　香豆素314(>98.0%(HPLC)(N))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP

FluoresceinChloride　氯化熒光素(>90.0%(HPLC))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP5.0

2',7'-Dichlorofluorescein　2',7'-二氯熒光素(>95.0%(HPLC))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP6

2,3-Diaminonaphthalene　2,3-二氨基萘(>98.0%(GC)(T))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP6,BR

DimidiumBromide　溴甲菲啶(>95.0%(HPLC)(N))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP6,BR,可用于細胞培養(yǎng)

7-(Dimethylamino)-4-methylcoumarin　7-(二甲基氨基)-4-甲基香豆素(>95.0%(GC)(T))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP6.0

7-(Dimethylamino)-4-(trifluoromethyl)coumarin　7-(二甲基氨基)-4-三氟甲基香豆素(>97.0%(GC)(T))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP6.0,BR

7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylicAcid　7-(二乙基氨基)香豆素-3-羧酸(>98.0%(GC)(T))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP6.4,BR

Ethyl6-[4-(Diphenylamino)phenyl]coumarin-3-carboxylate　6-[4-(二苯基氨基)苯基]香豆素-3-羧酸乙酯(>98.0%(HPLC))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP6.8

UranineK　熒光素二鉀　質(zhì)量規(guī)格：>99%,GSK-3α/β抑制劑

FluoresceinDiacetate　熒光素二乙酸酯(>98.0%(HPLC))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,III型