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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細胞名稱 人急性淋巴母細胞細胞；Molt-4

形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣；圓形

生長特性: 懸浮生長

特征特性: MOLT-4與MOLT-3來源于一名19歲的男性急性淋巴細胞性的復(fù)發(fā)患者，該患者前期接受過多種藥物聯(lián)合。MOLT-4細胞系為T淋巴細胞起源，p53基因的第248位密碼子有一個G→A突變，不表達p53，不表達免疫球蛋白或EB病毒；可產(chǎn)生高水平的末端脫氧核糖轉(zhuǎn)移酶；表達CD1(49%),CD2(35%),CD3A(26%)B(33%)C(34%),CD4(55%),CD5(72%),CD6(22%),CD7(77%)。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 維持細胞濃度在4×105/ml~2×106/ml；根據(jù)細胞濃度每2~3天補液1次。

傳代情況:

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項：

1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。

4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。

7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

N-甲基亞氨二乙酸(>98.0%(GC)(T))N-Methyliminodiacetic4408-64-4

N-甲基野靛堿（標(biāo)準(zhǔn)品）N－Methylcytisine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

N-甲基*度酸N-Methyl849630-94-0

N-甲酰-DL-色氨酸Nalpha-Formyl-DL-tryptophan質(zhì)量規(guī)格：0.98

N-甲酰伐倫克林N-Formyl796865-82-2

N-甲酰長春堿(長春新堿雜質(zhì)G)N-Formyl54022-49-0

N-葡萄糖苷伐倫克林Varenicline873302-31-9

N-羥基丁二酰亞胺(>98%,BR)N-Hydroxysuccinimide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

N-羥基利魯唑N-Hydroxy179070-90-7

N-羥基諾氟沙星N-Hydroxy109142-49-6

N-羥乙酰神經(jīng)氨酸N-Glycolylneuraminic1113-83-3

N-去丁基布比卡因N-Desbutyl15883-20-2

N-去甲氮卓斯汀N-Desmethyl47491-38-3

N-去甲基-4-羥基它莫西芬(大約1:1混合物)

N-去甲基-4-羥基它莫西芬-d5(1:1混合物)
人急性淋巴母細胞細胞；Molt-4規(guī)格Methylnonadecanoate　十九酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Malonate　丙二酸(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

D-(?)-Isoascorbicacid　D-異抗壞血酸(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Linoleicacid　亞油酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

LeucocrystalViolet　隱色結(jié)晶紫(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Lauricacid　月桂酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Nervonicacid　神經(jīng)酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

PentadecanoicAcid　十五烷酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

(+)-Pantothenicacidcalciumsalthydrate　泛酸鈣一水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Potassiumsorbate　山梨酸鉀(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Pentadecafluorooctanoicacid　全氟辛酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

n-Octanoicacid　正辛酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.9%(GC))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Ricinoleicacid　蓖麻油酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Stearicacid　硬脂酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

SodiumCyclamate　甜蜜素(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR