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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
小鼠細(xì)胞;EL4.IL-2說(shuō)明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZX7865
  • 發(fā)布日期: 2020-12-08
  • 更新日期: 2025-01-15
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
保存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZX7865
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來(lái)源 詳見說(shuō)明書
細(xì)胞形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號(hào)
保質(zhì)期 詳見說(shuō)明書
器官來(lái)源 詳見說(shuō)明書
免疫類型 A型
品系 詳見說(shuō)明書
生長(zhǎng)狀態(tài) 懸浮生長(zhǎng)
物種來(lái)源 詳見說(shuō)明書
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

傳代方法:

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

產(chǎn)品名稱

小鼠細(xì)胞;EL4.IL-2說(shuō)明書

生長(zhǎng)特性

懸浮生長(zhǎng)

貨號(hào)

LZX7865

細(xì)胞名稱 小鼠細(xì)胞;EL4.IL-2

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞

生長(zhǎng)特性: 懸浮生長(zhǎng)

特征特性: 這是EL4(ATCCTIB-39)的一個(gè)能對(duì)12-十四烷酸-13-醋酸佛波醇(PMA)反應(yīng)生成IL-2的亞株。在含PMA的培養(yǎng)基中24小時(shí)后生成的IL-2濃度達(dá)2500U/ml。檢測(cè)表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%

傳代方法: 1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。

傳代情況: PN5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

 


注意事項(xiàng):

1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的)。

3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

 

操作要點(diǎn):

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明:本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品,嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

5-氟-1,3-二甲基尿嘧啶5-Fluoro-1,3-dimethyluracil質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

5-氟-2‘-脫氧尿苷;氟尿苷5-Fluoro-2'--deoxyuridine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

5-氟胞苷(>98%,BR)5-Fluorocytidine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

5-氟二氫嘧啶-2,4-二酮5-Fluorodihydropyrimidine-2,4-dione質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

5-氟尿嘧啶核苷5-Fluorouridine質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

5-氟乳清酸;5-FOA5-Fluoroorotic703-95-7

5-氟乳清酸水合物5-Fluoroorotichydrate

5-氟脫氧胞苷5-Fluoro-2'-deoxycytidine質(zhì)量規(guī)格:98%,進(jìn)分

5-氟吲哚-2-羧酸5-Fluoroindole-2-carboxylic399-76-8

5-磺基水楊酸sulfosalicyclic5965-83-3

5-甲基-1,10-菲咯啉水合物(>98.0%(T))5-Methyl-1,10-phenanthroline3002-78-6

5-甲基胞嘧啶5-methylcytosine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

5-甲基尿苷5-Methyluridine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

5-甲基四氫葉酸5-MTHF;5-MethyltetrahydrofolicCalcium

5-甲基煙酸5-Methylnicotinic3222-49-9
小鼠細(xì)胞;EL4.IL-2說(shuō)明書Ficol70 聚蔗糖70 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Guanidinecarbonate 碳酸胍(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Hydrazinehydrochloride 鹽酸肼(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Iron(III)sulfate,hydrate 水合硫酸鐵(>99%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Methylgallate 沒食子酸甲酯(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Myokinase 肌激酶(比活性:>200U/mg,BC) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

PhosphodiesteraseIIfromBovineSpleen 磷酸二酯酶II 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Succinimide 丁二酰亞胺(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

5-Bromouridine 5-溴尿苷(>99%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

ADAbuffer,disodiumsalt ADA緩沖液二鈉鹽(>99%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Albumin,frombovineProteasefree 無(wú)蛋白酶牛血清白蛋白 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Aluminumstearate 硬脂酸鋁 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Bismuth(III)nitratepentahydrate 鉍試劑III(>99%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Calciumphosphate,dibasic,dihydrate 磷酸氫鈣二水(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Cerium(III)carbonate,hydrate 碳酸鈰 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

 


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