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細(xì)胞名稱 人細(xì)胞；EWS-Z

形態(tài)特性: 上皮樣

生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)

特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。

3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

三溴化 Ethyl Orange 質(zhì)量規(guī)格：pH指示劑蛋白激酶受體B1+B2抗體

五化 4Ethoxychrysoidine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)化神經(jīng)細(xì)胞鳥(niǎo)苷置換因子Ephexin1抗體

五化二 DAABDCl [=4[2(Dimethylamino)ethylaminosulfonyl]7chloro,1,3benzoxadiazole] 質(zhì)量規(guī)格：用于蛋白質(zhì)組分析，用于高效液相色譜標(biāo)記，熒光染料，用于質(zhì)譜的衍生化試劑化Ephrin B抗體

赤 2,3Naphthalenedialdehyde 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)丟失蛋白EPLIN抗體

1(1金剛基)基... DBDF [=4(N,NDimethylaminosulfonyl)7fluoro,1,3benzoxadiazole]  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)化HER2受體抗體

D半乳糖鹽鹽 N(1Pyrenyl)maleimide 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)化HER3受體抗體

2,6二肼鹽鹽 Alvimopan 質(zhì)量規(guī)格：刪除；精神管制化HER4抗體

3,5二肼鹽鹽 Myristyl sulfobetaine 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,BR轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體

2,5二肼鹽鹽 3(N,NDimethylpalmitylammonio)propanesulfonate(SHDAB) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR化轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體

2,5二肼鹽鹽 Lithium Dodecyl Sulfate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí)真核肽鏈釋放因子1抗體

2,4二肼鹽鹽 Sulfobetaine 8 質(zhì)量規(guī)格：>98%,sigma分裝真核肽鏈釋放因子3a抗體

3,5二肼鹽鹽 Sulfobetaine 10 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR表皮生長(zhǎng)因子受體底物15抗體

3,5雙()... Sulfobetaine 12,SDDAB 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN1抗體

2肼基鹽鹽 Entacapone 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN2抗體

4氰基肼鹽鹽 Triton X14 質(zhì)量規(guī)格：BC內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位蛋白ERGI3抗體

3()肼鹽... Triton X05 質(zhì)量規(guī)格：70% in H2O內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氧化物蛋白Ero1Lα抗體

2()... CHAPS 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp19抗體
人細(xì)胞；EWS-Z規(guī)格PamidronateDisodium　帕米磷酸二鈉　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

PamidronateDisodium　帕米磷酸二鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

Gentamicinsulfate　硫酸慶大霉素　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

Gentamicinsulfate　硫酸慶大霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

CefuroximeSodium　頭孢呋辛鈉　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

CefuroximeSodium　頭孢呋辛鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

CeftriaxoneSodium　頭孢曲松鈉　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

CeftriaxoneSodium　頭孢曲松鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

CeftazidimewithSodiumCarbonate　頭孢他啶(含碳酸鈉)　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

CefazolinSodium　頭孢唑啉鈉　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

CefazolinSodium　頭孢唑啉鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

PiperacillinSodium　哌拉西林鈉　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

PiperacillinSodium　哌拉西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

CiclopiroxOlamine　環(huán)吡司胺;環(huán)吡酮胺　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

CiclopiroxOlamine　環(huán)吡司胺;環(huán)吡酮胺（標(biāo)準(zhǔn)品）　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)