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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
突變型Cas9穩(wěn)定表達的人細胞;Hep3b-mCas9-747供應商
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZX7556
  • 發(fā)布日期: 2020-12-07
  • 更新日期: 2025-01-16
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
品牌 聯祖
貨號 LZX7556
用途 公司產品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態(tài) 上皮樣
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 A型
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 貼壁生長
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格
純度 %
是否進口

細胞名稱 突變型Cas9穩(wěn)定表達的人細胞;Hep3b-mCas9-747

形態(tài)特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞是采用慢病毒感染的方式使Hep3b細胞穩(wěn)定表達突變型的Cas9蛋白,該蛋白可以降低基因編輯時的脫靶效率,經2.0ug/mlPuromycin篩選得到的單,經WesternBlotting驗證該可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS;2.0ug/mlPuromycin

傳代方法: 1:4~1:6傳代,每周換液2次

傳代情況:

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

 


特別聲明:本產品及我公司所售其他產品均為科研類試劑產品,嚴禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

產品名稱

突變型Cas9穩(wěn)定表達的人細胞;Hep3b-mCas9-747供應商

生長特性

貼壁生長

貨號

LZX7556

傳代方法:

產品僅用于科研收到細胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。

(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內繼續(xù)培養(yǎng)。。

(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細胞不適應而造成生長不好。

 

操作要點:

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內完全解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。

6)產品僅用于科研觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
注意事項:

1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。

4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。

7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

FNELISAKit大鼠纖連蛋白  規(guī)格:20mg  

NP9HumanNandrolonePhenylpropionate)ELISAKit人苯丙酸諾龍/苯丙酸去甲睪酮  規(guī)格:20mg  

16-AlphaOHE-1(Human16-AlphaHydroxyestrogen1)ELISAKit人16α羥基雌酮1  規(guī)格:20mg  

CNTFELISAKit大鼠睫狀神經營養(yǎng)因子  規(guī)格:20mg  

BMPR-IIELISAKit大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ  規(guī)格:1g  

GR-Beta(Humanglucocorticoidreceptor-Beta)ELISAKit人糖皮質激素受體β  規(guī)格:HPLC≥98%,5mg/支  

BMPR-1AELISAKit大鼠骨成型蛋白受體1A  規(guī)格:20mg  

GR-Alpha(Humanglucocorticoidreceptor-Alpha)ELISAKit人糖皮質激素受體α  規(guī)格:1g  

BMP-4ELISAKit大鼠骨成型蛋白4  規(guī)格:20mg  

BMP-2ELISAKit大鼠骨成型蛋白2  規(guī)格:10mg  

u-T3(HumanUltrasensitivityTri-iodothyronine)ELISAKit人高敏三碘甲狀腺原氨酸  規(guī)格:20mg  

HFABPELISAKitrat(Heartfattyacid-bindingprotein)大鼠脂肪酸結合蛋白  規(guī)格:20mg  

CCK-8(Ratcholecystokininoctapeptide)ELISAKit大鼠膽囊收縮素/縮膽囊素八肽  規(guī)格:20mg  

COX-2(ratcyclooxygenase-2)ELISAKIT大鼠環(huán)加氧酶2  規(guī)格:20mg  

BDNFELISAKit大鼠腦源性神經營養(yǎng)因子  規(guī)格:20mg  
突變型Cas9穩(wěn)定表達的人細胞;Hep3b-mCas9-747供應商構樹堿A173220-07-0英文名:Broussonetine A  

CAS登錄號:173220-07-0

分子式:C24H45NO10

分子量:507

分子結構:

外觀:白色晶體

規(guī)格:20 mg/支

純度:≥ 98%

用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

提取來源:桑科植物構樹Broussonetia papyrifera干燥葉

溶解性:可溶于、DMSO等溶劑。

:具有一定的、殺菌作用。

貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年

 


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