- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZX7573
- 發(fā)布日期: 2020-12-07
- 更新日期: 2025-01-16
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZX7573 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細胞形態(tài) | 上皮樣 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | A型 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 株 |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
特別聲明:本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品,嚴禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。
產(chǎn)品名稱 | 突變型Cas9穩(wěn)定表達的人細胞;Li-7-mCas9-764說明書 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | LZX7573 |
細胞名稱 突變型Cas9穩(wěn)定表達的人細胞;Li-7-mCas9-764
形態(tài)特性: 上皮樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞是采用慢病毒感染的方式使Li-7細胞穩(wěn)定表達突變型的Cas9蛋白,該蛋白可以降低基因編輯時的脫靶效率,經(jīng)2.0ug/mlPuromycin篩選得到的單,經(jīng)WesternBlotting驗證該可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;2.0ug/mlPuromycin
傳代方法: 1:2傳代;2~3天換液1次。
傳代情況:
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
傳代方法:
產(chǎn)品僅用于科研收到細胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。
注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細胞不適應(yīng)而造成生長不好。
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)產(chǎn)品僅用于科研觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
PFKP(Humanphosphofructokinase-platelet)ELISAKit人血小板型磷酸果糖激酶 規(guī)格:100mg
UGCG(HumanUDP-glucoseceramideglucosyltransferase)ELISAKit人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格:1.5g
Casp4(Humancaspase4-apoptosis-relatedcysteinepeptidase)ELISAKit人凋亡相關(guān)半胱氨酸肽酶4 規(guī)格:0.15ml
PDXK(Humancaspase4-apoptosis-relatedcysteinepeptidase)ELISAKit人吡哆醛/吡哆醇維生素B6激酶 規(guī)格:100mg
DPYSL2(humandihydropyrimidinase-like2)ELISAKit人二氫嘧啶酶樣2 規(guī)格:20mg/瓶
SGK2(Humanserum/glucocorticoidregulatedkinase2)ELISAKIT人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2 規(guī)格:100mg
MKK6(Humanmitogenactivatedproteinkinasekinase6)ELISAKit人絲裂原活化蛋白激酶激酶6 規(guī)格:20mg
PDXP(Humanpyridoxal/pyridoxinevitaminB6-phosphatase)ELISAKit人吡哆醛/吡哆醇維生素B6磷酸酶 規(guī)格:2g
Tgtp(HumanT-cellspecificGTPase)ELISAKit人T細胞特異性鳥苷三磷酸酶 規(guī)格:0.2g/支
FDFT1(Humanfarnesyl-diphosphatefarnesyltransferase1)ELISAKit人法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1 規(guī)格:100mg
D-LDH(HumanD-LactateDehydrogenase)ELISAKit人D-乳酸脫氫酶 規(guī)格:1g
Alpha1-AT(HumanAlpha1-Antitrypsin)ELISAKit人α1抗胰蛋白酶 規(guī)格:100mg
KLK1(HumanKallikrein1)ELISAKit人激肽釋放酶1 規(guī)格:50mg
KLK6(HumanKallikrein6)ELISAKit人激肽釋放酶6 規(guī)格:100mg
PaCoA(HumanPhosphorylatedacetylCoA)ELISAKit人磷酸化乙酰輔酶A 規(guī)格:100mg
突變型Cas9穩(wěn)定表達的人細胞;Li-7-mCas9-764說明書蒼耳亭26791-73-1英文名:Xanthatin
CAS登錄號:26791-73-1
分子式:C15H18O3
分子量:246
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色晶體
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:菊科植物蒼耳Xanthium sibiricum干燥成熟帶總苞的果實
溶解性:溶于、、乙醇,微溶于熱水,不溶于。
熔點:114.5~115℃
:抗菌、作用。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年