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實(shí)驗(yàn)操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。    

b．立即在無菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。  

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。   

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞；Li-7-Cas9-757說明書

形態(tài)特性: 上皮樣

生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)

特征特性: 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使Li-7細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Puro，經(jīng)2.0ug/mlPuromycin篩選得到的單，經(jīng)WesternBlotting驗(yàn)證該可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；2.0ug/mlPuromycin

傳代方法: 1:2傳代；2~3天換液1次。

傳代情況:

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，產(chǎn)品僅用于科研我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)； 

3、50ml離心筒2個(gè) 

4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 

記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)

產(chǎn)品僅用于科研可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

HumanpreptinELISAKit人preptin  規(guī)格：20mg  

PPAR-Alpha(Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha)ELISAKit人過氧化物酶體增殖物激活受體α  規(guī)格：20mg  

Apo-E(HumanApolipoproteinE)ELISAKit人載脂蛋白E  規(guī)格：0.1g  

OGP(HumanOsteogenicGrowthPeptide)ELISAKit人成骨生長(zhǎng)肽  規(guī)格：0.1g  

ODF(Humanosteoclastdifferentiationfactor)ELISAKit人破骨細(xì)胞分化因子  規(guī)格：0.1g  

OH-PYD(HumanHydroxy-Pyridiniumcrosslinks)ELISAKit人羥基膠原吡啶交聯(lián)  規(guī)格：0.1g  

DPD(HumanDeoxypyridinolinecrosslinks)ELISAKit人脫氧膠原吡啶交聯(lián)  規(guī)格：0.1g  

PYD(HumanPyridinolinecrosslinks)ELISAKit人膠原吡啶交聯(lián)  規(guī)格：0.1g  

SPA(HumanStaphylococalproteinA)ELISAKit人葡萄球菌蛋白A  規(guī)格：0.1g  

ConA(HumanconcanavalinA)ELISAKit人刀豆素A  規(guī)格：0.1g  

FEP(HumanFreeerythrocyteproloporphyrin)ELISAKit人游離原卟啉  規(guī)格：0.1g  

LBP(Humanlipolysaccharidebindingprotein)ELISAKit人脂多糖結(jié)合蛋白  規(guī)格：0.1g  

GSH-Px(HumanGlutathioneperoxidase)ELISAKit人谷胱甘肽過氧化酶  規(guī)格：0.25g  

GSH(Humanglutathione)ELISAKit人谷胱甘肽  規(guī)格：0.25g  

17-KS(Human17-ketosteroids)ELISAKit人17-酮類固醇  規(guī)格：HPLC≥98%;20mg  
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞；Li-7-Cas9-757說明書HederacolchisideA1106577-39-3英文名：Hederacolchiside A1  

CAS登錄號(hào)：106577-39-3

分子式：C47H76O16

分子量：896

分子結(jié)構(gòu)：

外觀：白色晶體

規(guī)格：5 mg/支

純度：HPLC≥98%

用途：用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。

提取來源：毛莨科植物白頭翁Pulsatilla chinensis (Bunge) Regel.

溶解性：可溶于、、乙醇等溶劑，不溶于。

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貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年