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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZX7346
- 發(fā)布日期： 2020-12-04
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 保存條件 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZX7346 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | 詳見說明書 |
| 細胞形態(tài) | 上皮樣 |
| 是否是腫瘤細胞 | 否 |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | A型 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 貼壁生長 |
| 物種來源 | 詳見說明書 |
| 包裝規(guī)格 | 株 |
| 純度 | % |
| 是否進口 | 是 |
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。
產(chǎn)品名稱 | Cas9穩(wěn)定表達的人惡性細胞；A375-Cas9-575說明書 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | LZX7346 |
細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人惡性細胞；A375-Cas9-575
形態(tài)特性: 上皮樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞是采用慢病毒感染的方式使A375細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單，經(jīng)WesternBlotting驗證該可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；1mM丙酮酸鈉+4mML-Glutamine；400ug/mlG418
傳代方法: 1:3~1:8傳代；2~3天換液1次。
傳代情況: C3
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
傳代方法：
產(chǎn)品僅用于科研收到細胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。
（二）如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。
注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細胞不適應(yīng)而造成生長不好。
注意事項：
1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
P450膽固醇側(cè)鏈裂解酶檢測試劑盒Cytochrome P450 Side Chain Cleavage Enzyme
α干擾素檢測試劑盒Interferon α
α酮戊二酸脫氫酶檢測試劑盒α ketoglutarate dehydrogenase
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶檢測試劑盒γ-glutamyl transpeptidase
δ氨基乙酰丙酸脫水酶檢測試劑盒δ-Aminolevulinic Acid Dehydratase
白細胞介素1檢測試劑盒Interleukin 1
白細胞介素1β檢測試劑盒Interleukin 1β
白細胞介素6檢測試劑盒Interleukin 6
白細胞介素8檢測試劑盒Interleukin 8
表皮生長因子檢測試劑盒Epidermal growth factor
丙二醛檢測試劑盒malondialchehyche
丙酮酸羧化酶檢測試劑盒pyruvate carboxylase
補體蛋白3檢測試劑盒Complement 3
補體蛋白4檢測試劑盒Complement 4
超敏C反應(yīng)蛋白檢測試劑盒high sensitivity C-Reactive Protein
垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽檢測試劑盒pituitary adenylate cyclase activating polypeptide
雌二醇檢測試劑盒Estradiol
Cas9穩(wěn)定表達的人惡性細胞；A375-Cas9-575說明書琥珀酸110-15-6中文別名：丁二酸
英文名：Succinic acid
英文別名：Amber acid
CAS登錄號：110-15-6
分子式：C4H6O4
分子量：118.09
分子結(jié)構(gòu)：
外觀：白色結(jié)晶
規(guī)格：20 mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源：松屬植物的樹脂久埋于地下而成的琥珀
溶解性：溶于水，微溶于乙醇、、、甘油。
熔點：185 ℃
：具有抗菌、中樞抑制、、等作用。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
