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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
LPO脂質過氧化物測試劑盒可見分光光度法
  • 品牌:聯祖
  • 產地:國產
  • 型號:100管/96樣
  • 貨號:LZ-01410S
  • 發布日期: 2020-12-02
  • 更新日期: 2025-04-29
產品詳請
產地 國產
品牌 聯祖
貨號 LZ-01410S
用途 公司產品僅用于科研
英文名稱
包裝規格 100管/96樣
純度 %
CAS編號
別名 線粒體活性氧產生速率(ROS)測試盒
分子式
是否進口

血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

LPO脂質過氧化物測試劑盒可見分光光度法

100/96

熒光法

LZ-01410S

商品介紹:

測定意義
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產物過氧化物和羥化物等,研究表明,機體95%以上的活性氧(ROS)都來自于線粒體,其失衡所致的氧化應激與細胞生長增殖、發育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程有關。

正常情況下,細胞內抗氧化防御系統與氧自由基處于平衡狀態,細胞內活性氧(ROS)水平維持在較低的生理范圍;在病理情況下,細胞內抗氧化系統與氧自由基的平衡被打破,細胞內活性氧水平過多,就可破壞線粒體酶類、脂類和核酸,使機體出現氧化應激,同時,活性氧還可攻擊線粒體DNA產生氧化損傷,導致線粒體ATP合成減少、線粒體膜電位破壞等結構和功能變化。

因此,通過檢測活性氧的變化來判斷線粒體的功能是否正常具有重要意義。

測定原理:

熒光探針-還原型二氯熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可擴散通過線粒體膜,在線粒體內被酯酶水解,形成無熒光的DCFHDCFH迅速與ROS反應生成熒光物—氧化型二氯熒光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF) 根據上述原理設計了利用熒光法直接定量檢測線粒體ROS產生速率的方法。將熒光強度隨時間變化的數據點擬合,線性回歸直線斜率與ROS產生的速率呈正比。

需自備的儀器和用品:

多功能酶標儀、恒溫培養箱、分析天平、可調式移液器、冰、蒸餾水。

實驗通用規則:
1、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
2、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
3、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
4、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5、實驗時,要使底物避光保存。
6、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。
8、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
10、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

SERPINF2 Others Mouse 小鼠 SerpinF2 人細胞裂解液 (陽性對照) N-三苯甲基洛沙坦(洛沙坦雜質H)質量規格:美國進口N-Trityl Losartan (Losartan Impurity H)

軟骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)洛沙坦-d3質量規格:美國進口Losartan-d3

JTB Others Human 人 Jumping anslocation Breakpoi / JTB 人細胞裂解液 (陽性對照) 羧酸洛沙坦質量規格:美國進口Losartan Carboxylic Acid

615小鼠網織細胞性瘤株;L615洛沙坦質量規格:美國進口Losartan Carboxaldehyde

SK-LU-1細胞,人低分化 大鼠腎成纖微細胞,NRK-49F細胞 CL-0106HFL1(人)5×106cells/瓶×2MQAE(氯離子熒光探針)質量規格:進分N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium bromide
NCI-H1703[H1703]細胞,人細胞 人細胞,5637(HTB-9)細胞 人視網膜色素上皮細胞HRPEpiCStearicAcid脂蠟酸100克CP,98.5%

貂源細胞1-錄代;α-錄代 1-Chloroncphclqnq

MMP7 Others Human 人 MMP7 人細胞裂解液 (陽性對照) Fraser添加劑shēng huà shì jì容量:1米

CM-R052大鼠細胞完全培養基100mLRuDP1,5-二嶙酸-D-核酮糖5克BR,98%

RSPO2 Others Human 人 FTLS / RSPO2 (186 Leu/Pro) 人細胞裂解液 (陽性對照) 3153-37-54-錄, 98%metxyl 4-chlorobutyrate
人腺泡上皮癌;HPAC滅草煙,咪唑煙酸Imazapyr acid質量規格:>98%

EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK (aa 563-987) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 咪唑煙酸(標準品)Imazapyr acid質量規格:HPLC>99%,標準品

RDFs, 大鼠真皮成纖維細胞石膽酸(標準品)Lithocholic Acid質量規格:>97(GC),標準品

rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞 [CIP 104786]細胞 293 [HEK-293] (人胚腎細胞)氧嗪酸鉀Potassium Oxonate質量規格:>98%

人T瘤轉基因細胞;Jurkat D,E氧嗪酸鉀(標準品)Potassium Oxonate質量規格:>98%,標準品
LPO脂質過氧化物測試劑盒可見分光光度法CM-R097大鼠皮下脂肪細胞完全培養基100mLN-叔丁氧羰基-L-酸,英文名或英文縮寫:BOC-L-Alanine,級別:BR,99%,規格:25克

CTLA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CTLA4 / CD152 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-錄-2,2-二基炳醋 99% 3-CHLORO-2,2-DIMqTHYLPROPIONIC cCID 13211-38-1

小鼠顆粒細胞MGCpotewwiumSULFATE,ANxy7noUS無水鉀ACS級白色結晶RTsigma

UI-1細胞,人細胞 大鼠小腸隱窩上皮細胞,IEC-6細胞 人氣管平滑肌細胞HTSMC對羥基本乙鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:Tyramine xy7nochloride,級別:BR,98%,規格:5克

HOS(人細胞) 5×106cells/瓶×2134-31-68-羥基鹽;-8-羥基;氧化;奎諾蘇8-xy7noxyinoneoline sulfate;8-inoneopxenol sulfate;Oxine sulfate;inoneosol;Chinosol

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