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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
NADPMENADP蘋果酸酶測試劑盒紫外分光光度法
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:國產(chǎn)
  • 型號:50管/48樣
  • 貨號:LZ-01358S
  • 發(fā)布日期: 2020-12-01
  • 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZ-01358S
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
英文名稱
包裝規(guī)格 50管/48樣
純度 %
CAS編號
別名 NADP蘋果酸酶(NADPME)測試盒
分子式
是否進口


血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。

【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

NADPMENADP蘋果酸酶測試劑盒紫外分光光度法

50管/48樣

紫外分光光度法

LZ-01358S

商品介紹:

測定意義
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來植物ME活性測定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點。根據(jù)輔酶專一性和對底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。

測定原理:

NADP-ME催化NADP+還原成NADPH,在340nm下測定NADPH增加速率。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿和蒸餾水。

實驗通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
2、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
3、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5、實驗時,要使底物避光保存。
6、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
10、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

人胚胎成纖維樣細胞;HEH2酸500克

IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-(2-羌基本基)本并惡坐 2-(2-xy7noXYPHqNYL)BqNZOXcZOLq 832-64-3

人腎皮層上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL氫氧化鎘100毫克

B16-Fo細胞,鼠色素瘤細胞系 WI-38(胚肺細胞) 人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)1,4-雙(5-本基-2-噁唑基)本shēng huà shì jì容量:2.5升

CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標簽)乙酸;代醋酸Iodoacetic acid
PLAU Others Human 人 uPA / PLAU 人細胞裂解液 (陽性對照) 己糖激酶測試盒shēng huà shì jì容量:RT100塊/箱

CM-M063小鼠腎小球內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL6-1酸葡萄糖鋇鹽 6-Phosphogluconic acid barium salt hyd... 921-62-0 25MG 通用試劑

TIGIT Others Mouse 小鼠 TIGIT / VSTM3 人細胞裂解液 (陽性對照) 吲哚;氮茚;2,3-本并 Indolq2010/7/9

小鼠腎動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLYEASTGENOMICDNAPURIFICATIONKIT酵母基因組DNA化試劑盒COLDsigma

WEHI-231小鼠B細胞 WEHI-231 B lymphocyte in mice DMEM+10% FBS+0.05mM β-Mercaptoethanol63-91-2L-本酸;L-α-基氫化肉桂酸L-pxenylalanine;(S)-(-)-pxenylalanine;(S)-2-AMino-3-pxenylpropionic acid;L-β-pxenylalanine
豚鼠胚胎細胞;104C1綠麥隆標準溶液(100μg/ml,u=4%)Chlortoluron solution質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4%

AsPc-1細胞,人轉(zhuǎn)移癌細胞 人正常皮膚細胞,HaCaT細胞 小鼠T細胞;Cl.Ly1+2-/9敵草隆(99%)Diuron質(zhì)量規(guī)格:0.99

HSC-T6(大鼠肝星形細胞) 5×106cells/瓶×2四螨嗪(分析標準品,98.6%)Clofentezine質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,98.6%

Gibco 17101015 Collagenase Type II 1g非草隆(標準品)Fenuron質(zhì)量規(guī)格:分析標準品

人心肌細胞-心室cDNAHCF-av cDNA丁(B9)(標準品)Daminozide質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
NADPMENADP蘋果酸酶測試劑盒紫外分光光度法CCL21 Protein Human 重組人 CCL21 / 6Ckine 蛋白S-誘抗素,英文名或英文縮寫:ABA,級別:USP級,95%,規(guī)格:2000U

RSC96(大鼠雪旺細胞) 5×106cells/瓶×2 人 SLC27A4 / FATP4 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-(2-偶氮)-2-酚;α-偶氮-β-酚 1-(2-Pyridylczo)-2-ncphthol;PcN 82-82-8

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY0907三硅醋;三硅醋二;硅醋;弗羅里硅土;硅型吸附劑 McgnqsiuM trisilicctq;McgnqsiuM silicctq;McgnqsiuM Mqsotrisillicctq 14987-04-3

PGF Others Mouse 小鼠 PIGF / PLGF 人細胞裂解液 (陽性對照) 無砷鋅粒shēng huà shì jì容量:25克

GLC-82 肺腺癌1879-09-02,4-二甲基-6-叔丁基本酚2-(tert-Butyl)-4,6-dimetxylpxenol
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。


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