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傳代方法：

產品僅用于科研收到細胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細胞不適應而造成生長不好。

細胞名稱 蚊子幼蟲體細胞；AedesalbopictuscloneC6/36

形態(tài)特性:

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 蚊子幼蟲體細胞；貼壁生長

培養(yǎng)條件:

傳代方法:

傳代情況:

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項：

1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。

4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。

7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。

6）產品僅用于科研觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
特別聲明：本產品及我公司所售其他產品均為科研類試劑產品，嚴禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 人急性T淋巴細胞細胞；JurkatE6-1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Corynebacterium pseudodiphtheriticum Lehman ..細胞名稱: 人乳腺導管癌細胞；MDA-MB-435 L15:LeibovitzMedium10%FBS

Pseudomonas aeruginosa (Schroeter) Migula細胞名稱: 人細胞；MDA-MB-436 L15:LeibovitzMedium10%FBS；10mcg/mlinsulin,16mcg/mlglutathione

Nectria candicans (Plowright) Samuels細胞名稱: 人肺鱗癌細胞；NCI-H1703 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

dried細胞名稱: 人大細胞細胞；NCI-H460 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 人肺鱗癌細胞；NCI-H2170 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Trichomitus sp.細胞名稱: 人大細胞細胞；NCI-H661 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Ochroconis gallopavum (Cooke) de Hoog, anam ..細胞名稱: 人小細胞細胞；NCI-H69 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Simian virus 40, Simian virus 40細胞名稱: 人漿細胞細胞；NCI-H929 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；0.05mM2-巰基乙醇

Bacillus pumilus Meyer and Gottheil細胞名稱: 人結直腸腺癌細胞；NCI-H716 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 人卵巢上皮細胞癌細胞；OV-1063 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Mus musculus, mouse Target Gene: RIKEN cDNA ..細胞名稱: 人卵巢腺癌細胞；OVCAR-3 RPMI1640(w/oHepes)20%FBS

Candida takata Lee細胞名稱: 人非小細胞細胞；NCI-H524 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 人胚腎細胞；293FT DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；0.1mMMEMNon-Essential+AminoAcids(NEAA)+2mML-glutamine+1%Pen-Strep(optional)+500?g/mlGeneticin

Homo sapiens, human細胞名稱: 小鼠細胞；B16-F1 DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

Sporidiobolus salmonicolor Fell et Tallman細胞名稱: 人胸腺激酶缺陷型細胞；143TK- MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS
蚊子幼蟲體細胞；AedesalbopictuscloneC6/36規(guī)格髓系細胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒PF3ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3)ELISA試劑盒PF3ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒PF3ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒PF3ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

降鈣素(CT)ELISA試劑盒PF-4ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒PF-4ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒PF-4ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒PF-4ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。