血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明！
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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檢測(cè)方法
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貨號(hào)
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H輔酶ⅡNADP測(cè)試劑盒微量法
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100管/48樣
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微量法
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LZ-01349S
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商品介紹：
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測(cè)定意義
輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，NADP+和NADPH含量測(cè)定可以計(jì)算NADP（NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值，其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應(yīng)密切相關(guān)。NADPH/NADP+比值不僅是細(xì)胞氧化還原態(tài)的主要標(biāo)志之一，而且在PPP途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調(diào)控作用。
測(cè)定原理
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP+和NADPH。NADPH通過(guò)PMS的遞氫作用，使氧化型噻唑藍(lán)（MTT）還原為甲瓚，570nm下檢測(cè)吸光值，從而測(cè)定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP+為NADPH，從而檢測(cè)NADP+含量。
所需的儀器和用品
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
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實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會(huì)自然流下去。
2、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
3、溫浴時(shí)，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
5、實(shí)驗(yàn)時(shí)，要使底物避光保存。
6、洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí)，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
10、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。
SOST Others Rat 大鼠 SOST / Sclerostin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 依魯替尼(PCI32765)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BTK抑制劑Ibrutinib,PCI-32765
人張氏肝細(xì)胞;Chang liver右旋蘭索拉唑(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定，標(biāo)準(zhǔn)品(R)-Lansoprazole
IL17RC Others Human 人 IL17RC (aa 1-454) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 右旋蘭索拉唑質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR(R)-Lansoprazole
恒河猴腎細(xì)胞;RM-3樂(lè)伐替尼質(zhì)量規(guī)格：>98%,VEGFR抑制劑Lenvatinib(E7080)
HuT78細(xì)胞，T細(xì)胞細(xì)胞 惡性色素瘤,A375細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;HH-015-硝基吲哚(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)5-Nitroindole
平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基SMCM-prf3,5-二扶/3,5-二扶嘧啶，英文名或英文縮寫(xiě)：3,5-Difluoropyridine，級(jí)別：CP，規(guī)格：500克
TOV-112D細(xì)胞，人上皮性細(xì)胞 人腎小管近段上皮細(xì)胞,HK-2細(xì)胞 子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞Many types of
cells包裝：5 × 105方(1ml)四甘醇 Tetraglycol
31692-85-0 100G 通用試劑
豬腎細(xì)胞;PK(15)氧化鑭 LcnthcnuM oxidq;LcnthcnuM
trioxidq;LcnthcnuM sqsquioxidq 131-81-8
PIGR Others Human 人 PIGR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鈉測(cè)試盒(帶標(biāo)準(zhǔn))shēng huà shì jì容量：RT10個(gè)
CM-M047小鼠腸微細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL7782-92-5基鈉(*)wo7ium amide
人胚胎;WI-38 人腸微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL羅哌卡因-d7Ropivacaine-d7質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
人小細(xì)胞細(xì)胞;NCI-H446羅哌卡因鹽酸鹽-d7Ropivacaine-d7 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
TNFRSF1B Others Cynomolgus 食蟹猴 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 羅舒伐他汀內(nèi)酯Rosuvastatin
Lactone質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
人胃粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL(3R,5R)-羅舒伐他汀(3R,5R)-Rosuvastatin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
MFC細(xì)胞，小鼠細(xì)胞 BHK(幼倉(cāng)鼠腎細(xì)胞) 獼猴肺細(xì)胞;MML2羅舒伐他汀酰基-β-D-葡萄糖苷酸Rosuvastatin
Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
H輔酶ⅡNADP測(cè)試劑盒微量法SIAE Others Human 人 sialate O-acetylesterase
/ SIAE 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2-硝基本，英文名或英文縮寫(xiě)：2-nitnoaniline，級(jí)別：高，88%，規(guī)格：5克
CL-0405NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2流醋博來(lái)每速 BlqoMycin
Sulfctq 9041-93-4
人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Sars蛋白表達(dá)株，293001A細(xì)胞 NCI-H596 [H596](人細(xì)胞)鈦黃，英文名或英文縮寫(xiě)：Titan yellow，級(jí)別：生物技術(shù)級(jí)，規(guī)格：1克
人肺鱗癌細(xì)胞;NCI-H520RNAELECTROPHORESISKITRNA電泳試劑盒01 KitRT
HAVCR1 Others Rat 大鼠 KIM1 / TIM1 / HAVCR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (營(yíng)養(yǎng)肉湯)
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
