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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細(xì)胞名稱 人細(xì)胞；MDA-MB-157

形態(tài)特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞源自一位患有乳腺髓樣癌的44歲黑人女性，表達(dá)WNT7B癌基因，細(xì)胞與細(xì)胞邊界處有細(xì)胞橋粒、微絨毛、張力細(xì)絲。

培養(yǎng)條件: L15:LeibovitzMedium10%FBS

傳代方法: 1:2~1:3傳代；每周換液2~3次。

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

人胚；MRC-5形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長AFB1 Elisa Kit

恒河猴胚腎細(xì)胞；FRhK-4[FRhK4]形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Bovine IL-13 ELISA Kit

人慢性髓系細(xì)胞；K562形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Sheep Angiopoietin 1 (ANG1) ELISA Kit

小鼠細(xì)胞；B16-F1形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Sheep MMP-3 ELISA Kit

小鼠細(xì)胞；B16-F0形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Ovine HGF ELISA Kit

人羊膜細(xì)胞；WISH形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Feline HGF ELISA Kit

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；COLO320DM[COLO320DM]形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Guinea Pig IFNγ ELISA KIT

人小細(xì)胞；HIC形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Human FABP2/I-FABP ELISA KIT

羅猴胎腎細(xì)胞；MA104形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Canine IL-1β ELISA Kit

人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞；T47D[T-47D]形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Chicken IL-1α ELISA KIT

人腺癌細(xì)胞；F56形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Human HMGB1 ELISA KIT

人細(xì)胞；1590形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長人生長抑制特異性蛋白6檢測(cè)試劑盒

人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞；ACC-2形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Porcine IL-1α ELISA KIT

人細(xì)胞；Anglne形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Guinea Pig TNFa ELISA KIT

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞；SK-N-SH形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長兔血小板衍生生長因子酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒

人T細(xì)胞；HUT102形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Monkey IL-1β ELISA Kit
人細(xì)胞；MDA-MB-157價(jià)格可溶性白細(xì)胞分化抗原30(sCD30)ELISA試劑盒BAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA試劑盒BAFF-RELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA試劑盒BALPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒BAXELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒BAXELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒BaxELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒BB-AbELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒BCDFELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。