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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
加州立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR4251
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-01-09
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR4251
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

加州立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Xenohaliotis californiensis

LZR4251


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

嗜碳芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus carboniphilus

蝙蝠蛾擬青霉拉丁屬名: Paecilomyces hepiali

細鏈格孢注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

葡萄座腔菌拉丁屬名: Botryosphaeria dothidea

喉病毒拉丁屬名: Infectious       laryngotracheitis virus

美味側耳注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

馬賽菌拉丁屬名: Massilia eurypsychrophila

漢遜德巴利酵母漢遜變種拉丁屬名: Debaryomyces hansenii var. hansenii

Mycobacterium phocaicum 用途:研究 注意事項:僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用 模式菌株:非模式菌株 主要用途:研究 特征特性:TSA培養基,30℃培養24 h,菌體桿狀,0.6-0.7 μm × 3.0-8.2 μm,單個或成對排列,革蘭氏陽性。菌落乳脂色,圓形,不透明,邊緣整齊。

產品名毛木耳 注意事項:僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用 拉丁屬名:Auricularia 種名加詞:polytricha (Mont.) Sacc. 模式菌株:非模式菌株 主要用途:研究;教學 具體用途: 特征特性:子實體一般較大, 膠質,淺圓盤形、耳形或不規則形,直徑2-15 cm,有明顯基部,無柄,基部稍皺,新鮮時軟,干后收縮。子實層生里面,平滑或稍有皺紋,紫灰色,后變黑色。外面有較長絨毛,無色,僅基部褐色,長400-1100μm×4.5-6.5μm,常成束生長。擔子棒狀

果生鏈核盤菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

球毛殼拉丁屬名: Chaetomium globosum

小馬勃注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

炭黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus  carbonarius

類干酪乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus paracasei

刺盤孢菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

屎腸球菌拉丁屬名: Enterococcus faecium
加州立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書預染蛋白Marker分子量標準(10-250kDa) 10次 MBI分裝

ZNF230 英文名稱: 鋅指蛋白230 0.2ml

DACH1 英文名稱: 細胞命運決定因子DACH1 0.2ml

GOLM1 GOLM1 / GP73 鼠單抗 (FITC) Human

DSN1 英文名稱: 著絲粒相關蛋白DSN1 0.2ml

Apelin receptor Anti-Apelin receptor/APJ receptor 0.1ml

Anti-HBsAg/FITC 熒光素標記小鼠抗人表面抗原IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

CD31 英文名稱: 血小板內皮細胞黏附分子1 0.1ml

Anti-EphA4 R 酪氨酸蛋白激酶A4受體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

BLC-1/CXCL13(Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1) ELISA Kit 人B-淋巴細胞趨化因子Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-fowl typhoid and pullorum disease 雞白痢、雞傷寒Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rabbit IgG/APC APC標記的小鼠抗兔IgG 規格 0.1ml

CS(Human chondroitin sulfate) ELISA Kit 人軟骨素 96T

SLC37A4 英文名稱: 葡萄糖-6磷酸轉運蛋白 0.2ml

EGF 英文名稱: 小鼠抗表皮生長因子 0.1ml

蛋白磷酸酯酶-1 Anti-PP-1 0.1ml

Anti-Astrocyte/FITC 熒光素標記兔抗人星形膠質細胞IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Mst1(Thr183) 磷酸化蛋白激酶MST1 規格 0.1ml

GR (Glucocorticoid receptor) 糖皮質激素受體 多肽Multi-class antibodies規格: 0.5mg

大鼠性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒英文名稱:Rat sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA Kit特價促銷

大鼠胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒英文名稱:Rat thymus activation regulated chemokine,TARC ELISA Kit特價促銷

CSFV 英文名稱: 病毒 0.1ml

Anti-E.coli/EPEC 抗普通大腸埃希菌菌體蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml

IGF- II 小鼠樣生長因子-ⅡMulti-class antibodies規格: 48T

Anti-phospho-Pyk2 (Tyr881) 磷酸化富含脯氨酸的酪氨酸激酶2Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rat IgG/PE PE標記的小鼠抗大鼠IgG 規格 0.1ml

Hyp(Human hydroxyproline) ELISA Kit 人羥脯酸 96T

SARS S-protein 英文名稱: 抗表面S蛋白 0.1ml

 


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