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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4335
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-09
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4335 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | 50T | LZR4335 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
球型芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus sphaericus Meyer et Neide
毛栓孔菌拉丁屬名: Trametes hirsuta
醬油 氨基酸態(tài)氮、氯化鈉、三氯蔗糖拉丁屬名: 醬油 氨基酸態(tài)氮、氯化鈉、三氯蔗糖
紡錘雷素鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces netropsis
異常漢遜酵母拉丁屬名: Hansenula anomala
大豆慢生根瘤菌用途: 與大豆共生固氮
黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
米根霉拉丁屬名: Rhizopus oryzae
蘇云金芽孢桿菌用途: 害蟲生物防治
蠟樣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus cereus
枯草芽胞桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
膠紅酵母拉丁屬名: Rhodotorula mucilaginosa
根瘤菌用途: 固氮
黃硬皮馬勃用途: 外生菌根菌
芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書A2BP1 英文名稱： 蛋白2結(jié)合蛋白1 0.2ml
Anti-CD229/SLAMF3/FITC 熒光素標(biāo)記CD229IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
HBeAb(Mouse hepatitis B virus e antibody) ELISA Kit 小鼠eMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Caspase-13/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-13IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ELAVL1/HuR ELAVL1 規(guī)格 0.2ml
I CTP ELISA Kit 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽 96T
MTLR 英文名稱： 胃動(dòng)素受體 0.1ml
CDC42EP3 英文名稱： CDC42效應(yīng)蛋白3 0.1ml
Anti-Phospho-Mst1 (Thr183)/Mst2 (Thr180) 磷酸化蛋白激酶MSTMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
T(Human Testoterone) ELISA Kit 人睪酮Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-LTB4-R1 白三烯B4受體1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Kiss 1/Kisspeptin 轉(zhuǎn)移抑制基因 規(guī)格 0.1ml
FT4 ELISA Kit 大鼠游離甲狀腺素 96T
PCGF1 英文名稱： 表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白 0.2ml
小鼠Qa淋巴細(xì)胞抗原2(Qa-2)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse Qa lymphocyte antigen 2 region,Qa-2 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
小鼠Slit2 ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse Slit2 ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
TFF3 (trefoil factor3) 三葉肽因子3(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-BSEP 膽汁酸鹽輸出泵蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PDZD8 PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK8蛋白 規(guī)格 0.2ml
Cyclin G2 英文名稱： 周期素G2 0.1ml
Anti-CHK2 細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
STBM human 合體滋養(yǎng)細(xì)胞微絨毛膜Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CYP2C9 細(xì)胞色素P450 2C9Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NFAT1/NFATc2 核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白2 規(guī)格 0.1ml
Human small breast epithelial mucin,SBEM ELISA Kit 人小表皮粘蛋白 96T
phospho-TIRAP(Tyr86) 英文名稱： 磷酸化白細(xì)胞介素1受體銜接蛋白 0.1ml
