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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4272
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-09
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4272 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
大鼠源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | 50T | LZR4272 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
大腸桿菌用途: 研究DNA損傷機(jī)制及其啟動(dòng)子活性。
真姬菇用途: 用于科研教學(xué)。
紫色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces violaceus
費(fèi)希爾曲霉拉丁屬名: Aspergillus fischeri
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素A型拉丁屬名: perfringens Type A
蕓薹生鏈格孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
皺褶青霉拉丁屬名: Penicillium rugulosum
耐多抗諾卡氏菌拉丁屬名: Nocardia polyresistens
長(zhǎng)孢洛德酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
卷枝毛霉卷枝變型拉丁屬名: Mucor circinelloides f. circinelloides
安大略假絲酵母拉丁屬名: Candida ontarioensis
泡盛曲霉拉丁屬名: Aspergillus awamori
阿爾通山堿線菌拉丁屬名: Natrinema altunense
膠孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
食吡啶紅球菌拉丁屬名: Rhodococcus pyridinivorans
大鼠源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商Centaurin beta 2 英文名稱： CENTB2蛋白 0.1ml
Anti-CSP 環(huán)子孢子蛋白(約氏)Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
FGF-6 human 人成纖維生長(zhǎng)因子-6Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CNGA2 環(huán)核苷酸陽(yáng)離子通道蛋白α2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NOX4/NADPH oxidase 4 NADPH氧化酶4 規(guī)格 0.1ml
human HMGB-1 ELISA Kit 人高遷移率族蛋白B1 ELISA Kit 96T
TMEM16A 英文名稱： 跨膜蛋白16A/鈣激活氯離子通道 0.1ml
CD40L 英文名稱： CD40L 0.1ml
Anti-Phospho-NPM (Ser4) 磷酸化核仁磷酸蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ADAMTS4(Human ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif4) ELISA Kit 人ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1基元4Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-PAK1/2/3(Thr423) 磷酸化p21激活激酶1/2/3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HOXD10 同源盒蛋白HOXD10 規(guī)格 0.2ml
AGA(Human anti-gliadin antibody) ELISA Kit 人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白 96T
phospho-PI3 kinase p85 alpha + gamma (Tyr467 + Tyr199) 英文名稱： 磷酸化磷脂酰肌醇激酶 0.1ml
CHMP5 英文名稱： 染色質(zhì)修飾蛋白CHMP5 0.1ml
Anti-Phospho-Connexin 43 (Ser368) 磷酸化Connexin 43蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
6His-Tag 6個(gè)組氨酸Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CK8 細(xì)胞角蛋白8Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh NR2D/NMDAR2D 谷氨酸受體2D 規(guī)格 0.1ml
Tris 三羥甲基基甲烷 100g
TIAF1 英文名稱： TGFB1誘導(dǎo)抗凋亡因子1 0.2ml
CTAG2 英文名稱： /抗原2 0.2ml
Anti-L-enk 亮氨酸腦啡肽Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
16- Alpha OHE-1(Human 16- AlphaHydroxyestrogen 1) ELISA Kit 人16α羥基雌酮1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Lgr5/GPR49 Lgr5/GPR49Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh KLK9 激肽釋放酶9(舒素9) 規(guī)格 0.1ml
iso-Hyd(Human Isoprenaline Hydrochloride) ELISA Kit 人異丙 96T
Phospho-p90RSK (Thr359 + Ser363) 英文名稱： 磷酸化絲酸/蘇酸激酶p90RSK蛋白 0.1ml
