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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4231
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-09
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4231 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
溶藻弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Vibrio alginolyticus | LZR4231 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
孟氏假單胞菌DHVD3 (1,25-Dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
HIV假病毒 Z20-11VD4 (Vitamin D4) ELISA Kit規(guī)格: 1mL
紡錘形賴氨酸芽孢桿菌VE (Vitamin E) ELISA Kit拉丁屬名: Lysinibacillus fusiformis
卷枝毛霉VK1 (Vitamin K1) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor circinelloides
巨型艾美耳球蟲MEK (Methionine-Enkephalin) ELISA Kit 拉丁屬名: maxima
谷氨酸棒桿菌LEK (Leucine-Enkephalin) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
草菇PGI2 (Prostacyclin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
金黃色葡萄球菌ACSDKP (N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
銅綠假單胞菌HYD (Hydrocortisone) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa
構(gòu)巢曲霉LPS (Lipopolysaccharides) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus nidulans
家園鬼傘GSH (Glutathione) ELISA Kit用途: 資源真菌
杏鮑菇LAM (Lipoarabinomannan) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
蘇云金芽孢桿菌8-OHdG (8-Hydroxydeoxyguanosine) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus thuringiensis
熱帶頭梗霉OT (Oxytocin) ELISA Kit拉丁屬名: Cephaliophora tropica
香蕉Cortisol ELISA Kit用途: 植物病原菌
溶藻弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Leukotriene C4,LT-C4 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
ER- Alpha(phospho-Tyr537)peptide 磷酸化雌激素受體α抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
極光激酶B Anti-Aurora B 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Thr693) 磷酸化表皮生長因子受體 規(guī)格 0.1ml
D-MEM/F-12培養(yǎng)基(原裝) 10×1L Gibco
CD2 英文名稱： CD2 0.1ml
Anti-DNA PKcs DNA依賴蛋白激酶催化亞基Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
M-CSFR(Human Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptor,M-CSFR) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-FOXJ1/HFH-4 叉頭蛋白J1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml
SM(Human sphingomyelin) ELISA Kit 人鞘磷脂 96T
SP-A 英文名稱： 肺表面活性蛋白A 0.1ml
CHCHD5 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD5 0.2ml
Anti-CD72/Ly-32 CD72蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2) 磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-Bmi1/PCGF4 組蛋白相關(guān)Bmi1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PGBD3 PGBD3蛋白 規(guī)格 0.2ml
EGFR 表皮生長因子受體 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
THEG4/C1orf223 英文名稱： 高表達(dá)蛋白4 0.1ml
Crkl 英文名稱： 接頭蛋白CrkL 0.2ml
Anti-PI3K p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
GSH-Px(Human Glutathione peroxidase) ELISA Kit 人谷胱甘肽過氧化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MC-1R 黑皮質(zhì)素-1受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Junctophilin 3 連接蛋白JPH3 規(guī)格 0.2ml
ADV-Ag(Human Adenovirus Antigen) ELISA Kit 人腺病毒抗原 96T
phospho-p107(Thr369) 英文名稱： 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107 0.1ml
