- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4188
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-01-09
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4188 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
斯氏毛探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Trichomonas stableri | LZR4188 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
非洲黑蛋巢VB12 (Vitamin B12) ELISA Kit拉丁屬名: Cyathus africanus
花臉香蘑VC (Vitamin C) ELISA Kit拉丁屬名: Lepista sordida
RhodoligotrophosVD (Vitamin D) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodoligotrophos jinshengii sp/ nov/
大腸埃希氏菌VD2 (Vitamin D2) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
紫云英根瘤菌*VD3 (Vitamin D3) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium astragali
大鎖銀耳25-HVD3 (25-Hydroxy Vitamin D3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
球形節(jié)桿菌DHVD3 (1,25-Dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter globiformis
雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)VD4 (Vitamin D4) ELISA Kit拉丁屬名: Agaricus bisporus (Lange) Singer
釀酒酵母VE (Vitamin E) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
白靈側(cè)耳(白靈菇)VK1 (Vitamin K1) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus nebrodensis
串珠鐮孢*MEK (Methionine-Enkephalin) ELISA Kit 拉丁屬名: Fusarium moniliforme Sheldon
布蘭克假絲酵母LEK (Leucine-Enkephalin) ELISA Kit拉丁屬名: Candida blankii
平常假絲酵母PGI2 (Prostacyclin) ELISA Kit拉丁屬名: Candida insectamans
單生雞腿10ACSDKP (N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
帶小棒鏈霉菌HYD (Hydrocortisone) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces clavuligerus
斯氏毛探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商人相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE)ELISA試劑盒 英文名稱:Human TNF related activation induced cytokine,TRANCE ELISA Kit特價促銷
人相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子(TWEAK)ELISA試劑盒英文名稱:Human tumour necrosis factor related weak inducer of apoptosis,TWEAK ELISA Kit進(jìn)口/原裝
STAT6(signal transducers and activators of transduction 6) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-BRCA2 癌易感基因2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PEG10 高表達(dá)基因 規(guī)格 0.1ml
CD45RO 1:150 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Tuberin 英文名稱: 馬鈴薯球蛋白(性硬化) 0.2ml
CCNDBP1 英文名稱: 周期素D結(jié)合蛋白1 0.2ml
Anti-KSR1 Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
T.gondii(Human Toxoplasma Gondii ELISA Kit 人剛地弓形蟲Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Integrin Beta 3/CD61 整合素β3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh LDL 規(guī)格 0.1ml
f- BetahCG(Human free chorionic gonadotropin) ELISA KIT 人游離β絨毛膜激素 96T
PISD 英文名稱: 磷脂酰絲酸脫羧酶PISD 0.2ml
Beta cellulin 英文名稱: β細(xì)胞素 0.2ml
Anti-PH-4/P4H-TM 脯氨酸水解酶4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor) 成纖維細(xì)胞生長因子-7/纖維母細(xì)胞生長因子 (抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD105/Endoglin CD105Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PAX1 配對盒基因1 規(guī)格 0.1ml
NRP2 Kit Human 人 Neuropilin-2 / NRP2 ELISA配對 ELISA
Thrombin light chain 英文名稱: 凝血酶(凝血因子II)輕鏈 0.1ml
CPA1 英文名稱: 胰羧肽酶A1 0.1ml
Anti-nectin 2/CD112 細(xì)胞黏附分子CD112Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PLC Gamma1(Human Phospholipase C Gamma1) ELISA Kit 人磷酯酶Cγ鏈Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-NCoR1 核受體輔助抑制因子1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-6 白介素6 規(guī)格 0.1ml
MMP-7 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7 96T
phospho-P53(Ser392) 英文名稱: 磷酸化抑制基因P53 0.1ml