產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4182 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
旋毛蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規格 | Trichinella spiralis | LZR4182 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
墳墓節桿菌Sheep ACCPA (anti-cyclic citrullinated peptide antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter tumbae
假絲酵母屬Sheep Ta1 (Thymosin-α1) ELISA Kit拉丁屬名: Candida sp.
戴爾根霉Sheep PS1 (Presenilin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus delemar
花土溝游動微菌Sheep PACAP-38 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) ELISA Kit拉丁屬名: Planomicrobium huatugouensis
弗雷德里克斯堡假單胞菌Sheep PACAP-27 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 27) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
沃特曼籃狀菌Sheep NOS2/iNOS (Nitric Oxide Synthase 2, Inducible) ELISA Kit拉丁屬名: Talaromyces wortmannii
半園田頭菇Sheep IL-5 (Interleukin 5) ELISA Kit 用途: 可食用
彩色豆馬勃GHRL (Ghrelin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
根瘤菌GHRL (Ghrelin/Obestatin Preprohormone) ELISA Kit用途: 固氮
大腸埃希氏菌OB (Obestatin) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
污水土地桿菌Sheep Pg (Progesterone) ELISA Kit拉丁屬名: Pedobacter caeni
多主葡萄殼菌Sheep PRL (Prolactin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
黑木耳Sheep IgG (Immunoglobulin G) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
根癌土壤桿菌拉丁屬名: Agrobacterium tumefaciens
白馬勃Canine MCP-1 (Monocyte Chemotactic Protein 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
旋毛蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規格CD3 英文名稱: CD3 0.1ml
Anti-Phospho-Doublecortin (Ser297) 磷酸化雙皮質素Multi-class antibodies規格: 0.1ml
E.coli DH-5 Alpha 英文名稱: DH5α大腸桿菌菌體蛋白 0.1ml
磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α Anti-phospho-CaMK2a 0.1ml
Anti-Tumstatin/Col4a3/FITC 熒光素標記抑素IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HSP27 (Ser15) 磷酸化熱休克蛋白27 規格 0.1ml
CBP(CREB-binding protein) CREB結合蛋白抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
CCL28 英文名稱: 粘膜相關上皮趨化因子28 0.1ml
Anti-Phospho-NF-KappaB p105 (Ser933) 磷酸化細胞核因子p50/k基因結合核因子Multi-class antibodies規格: 0.1ml
MT2(Human Metallothionein 2) ELISA Kit 人金屬硫蛋白2Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-MATH1 腸道分化干細胞MATH-1蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KCNH1/EAG1 鉀離子通道蛋白EAG1 規格 0.1ml
GRH ELISA Kit 大鼠促生長激素釋放激素 96T
PKC epsilon 英文名稱: 蛋白激酶C 0.1ml
Anti-ADM/AM 腎上腺髓質素Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Alpha-ENaC 英文名稱: 鈉通道蛋白α ENaC 0.2ml
神經元特異性烯醇化酶 Anti-NSE 0.1ml
Anti-Smac/DIABLO/FITC 熒光素標記線粒體促凋亡蛋白IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Numb (Ser276) 磷酸化膜相關蛋白Numb 規格 0.1ml
Caspase-9 白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
人踝蛋白(talin)ELISA試劑盒英文名稱:Human talin ELISA Kit進口/原裝
COX7A2 英文名稱: 細胞色素c氧化酶7A2 0.1ml
Anti-HRH4/GPCR105 組織胺H4受體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
IL-1 Alpha (Human Interleukin 1 Alpha) ELISA Kit 人白介素1αMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-GnRHR 激素釋放激素受體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MOS 原癌基因絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MOS 規格 0.2ml
AQP-3(Human Aquaporin 3) ELISA Kit 人水通道蛋白3 96T
RAR gamma 英文名稱: 維受體γ 0.2ml