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PCR反應鑒定——PCR反應條件:

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品：

大腸埃希氏桿菌Sheep EGR3 (Early Growth Response Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia  coli

污黑腐皮殼Sheep APSA (Anti-Phosphatidyl Serine Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Valsa sordida Nitschke

假單胞菌Sheep MYH1 (Myosin Heavy Chain 1, Skeletal Muscle, Adult) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

小麥紋枯Sheep NUP133 (Nucleoporin 133kDa) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

熒光威克酵母Sheep PI3K (Phosphoinositide-3-Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Wickerhamia fluorescens

釀酒酵母Sheep A-CoA (Acetyl Coenzyme A) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

Shinella kummerowiae Lin et al.Sheep AKA (Anti-Keratin Antibody) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

無色桿菌屬Sheep DCLK1 (Doublecortin Like Kinase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Achromobacter piechaudii

產蝦青素鞘鞍單胞菌Sheep SPTAN1 (Alpha-Fodrin) ELISA Kit 拉丁屬名: Sphingomonas astaxanthinifaciens

針猴頭Sheep SOCS3 (Suppressors of Cytokine Signaling 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

庫爾勒海洋桿菌Sheep PK (Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit 拉丁屬名: Pontibacter korlensis

外外安德倫茨氏菌Sheep CLL1 (Collectin Liver 1) ELISA Kit拉丁屬名: Lentzea waywayandensis

巴西果小克銀漢霉Sheep APA (Anti-Phospholipid Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Cunninghamella bertholletiae

指狀青霉Sheep MMP-3 (Matrix Metalloproteinase 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium digitatum

黃須腹菌Sheep ERα (Estrogen Receptor Alpha) ELISA Kit 用途: 屬外生菌根菌
剛地弓形蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書人抗腎小管基底膜(TBM)ELISA試劑盒英文名稱：Human tubular basement membrane antibogy,TBM ELISA Kit特價促銷

人抗腎小球基底膜(GBM)ELISA試劑盒英文名稱：Human glomerular basement membrane antibogy,GBM ELISA Kit特價供應

人抗鼠(HAMA)ELISA試劑盒 英文名稱：Human antimous antibody,HAMA ELISA 特價促銷

人抗雙鏈DNA/天然DNA(dsDNA)ELISA試劑盒英文名稱：Human anti-double stranded DNA,dsDNA ELISA Kit進口/原裝

人抗髓磷脂IgA(AMA IgA)ELISA試劑盒 英文名稱：Human anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA Kit進口/原裝

PGC-1 Alpha(peroxisome proliferator-activated receptor- Gamma coactivator 1 Alpha) 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg

Anti-phospho-ATP citrate lyase(Ser455) 磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶Multi-class antibodies規格： 0.1ml

CCDCA 英文名稱： 卷曲螺旋結構域蛋白A 0.2ml

Anti-Kv1.3/PCN3 離子通道蛋白Kv1.3Multi-class antibodies規格： 0.2ml

FPB(Human fibrinopeptide B) ELISA Kit 人血纖肽/纖維蛋白肽BMulti-class antibodies規格： 48T

Anti-PTGEs 素E合成酶Multi-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh HBAB/AKR1C2 膽汁酸結合蛋白DDH2 規格 0.2ml

GDH/GLDH(Human Glutamate dehydrogenase) ELISA Kit 人谷酸脫氫酶 96T

PUMA 英文名稱： p53正向細胞凋亡調控因子 0.1ml

小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit特價供應

小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Kit進口/原裝

GCS (glucosylceramide synthase, GCS) 葡萄糖神經酰胺合成酶(抗原)Multi-class antibodies規格： 0.5mg

Anti-CD138/Syndecan-1 多配體蛋白聚糖1Multi-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PARP3 多腺苷二磷酸多聚酶3/多聚ADP-核糖聚合酶3 規格 0.2ml

NBL1 Kit Human 人 NBL1 / DAND1 / DAN ELISA配對 ELISA

TRP1 英文名稱： 酪酸酶相關蛋白1 0.2ml

COPS4 英文名稱： 信號轉導蛋白亞基4 0.2ml

Anti-Cathepsin H 組織蛋白酶HMulti-class antibodies規格： 0.2ml

BKCa channels(calcium-activated potassium channel) 鈣激活鉀通道蛋白Multi-class antibodies規格： 0.5mg

Anti-CTSG/CG 組織蛋白酶GMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PCDHGA11 原鈣粘蛋白γA11 規格 0.2ml

SPARCL1 Kit Human 人 SPARCL1 / SPARC-like 1 ELISA配對 ELISA

phospho-Tau protein (Ser579) 英文名稱： 磷酸化微管相關蛋白 0.1ml