產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4125 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬鏈球菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒 | Streptococcus sui | LZR4125 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
臭曲霉酸澀變種Sheep GHAb (Anti-Growth Hormone Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus foetidus var. acidus
葡萄座腔菌Sheep PHB (Prohibitin) ELISA Kit 拉丁屬名: Botryosphaeria dothidea
解脂亞羅酵母Sheep GAL7 (Galectin 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Yarrowia lipolytica
球狀枝孢Sheep F13A1 (Coagulation Factor XIII A1 Polypeptide) ELISA Kit 拉丁屬名: Cladosporium sphaerospermum
Bacillus safensis Satomi et al. Sheep ApoE (Apolipoprotein E) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
啤酒酵母Sheep FAK (Focal Adhesion Kinase) ELISA Kit用途: 實驗研究
球孢白僵菌Sheep ATA (Angiotensinase A) ELISA Kit用途: 鱗翅目害蟲生物防治
金針菇8號Sheep CK-19/KRT19 (Cytokeratin 19) ELISA Kit用途: 食藥用
麥克默多生孢八疊球菌Sheep ANG II R2/AGTR2 (Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Sporosarcina macmurdoensis
樟疫霉Sheep IL-23 (Interleukin 23) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
粘質沙雷氏菌Sheep PARP4 (Poly ADP Ribose Polymerase 4) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
柳屬半明小黑腐皮殼菌Sheep PGAM2 (Phosphoglycerate Mutase 2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
大腸埃希菌Sheep SDC1 (Syndecan 1) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
釀酒酵母Sheep IL-27 (Interleukin 27) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
小孢毛霉Sheep SHBG (Sex Hormone Binding Globulin) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor parvispora
豬鏈球菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒 AFP 英文名稱: 甲胎蛋白AFP 0.1ml
Anti-Bim(phospho Ser87)/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化細胞死亡調解子IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Mouse small nuclear ribonucleoprotein,snRNP/Sm ELISA Kit 小鼠抗小核糖核蛋白/SmMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-phospho-Bim(Ser55) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化細胞死亡調解子IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ER-Alpha 雌激素受體α 規格 0.1ml
apo-B100 (Rabbit apoprotein B100) ELISA Kit 兔載脂蛋白B100 96T
MMP-2 英文名稱: 基質金屬蛋白酶2 0.1ml
CCDC30 英文名稱: 卷曲螺旋結構域蛋白30 0.2ml
Anti-KLK10 激肽釋放酶10Multi-class antibodies規格: 0.2ml
F XII (Human coagulation factor XII ) ELISA Kit 人凝血因子ⅫMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-PRL3/PTP4A3 磷酸酯酶3蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HDAC2/HD2 組蛋白去乙酰化酶2 規格 0.1ml
GRP(Human gastrin-reliasing peptide) ELISA Kit 人胃泌素釋放多肽 96T
PAR4 英文名稱: 蛋白酶活化受體4 0.1ml
小鼠性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA Kit進口/分裝
human-VEGF/ELISA 人內皮生長因子Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Claudin-11 少突膠質細胞跨膜蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh nNos/NOS-1 一氧化氮合成酶-1(神經型) 規格 0.1ml
Human vitronectin,VNR ELISA Kit 人玻連蛋白/體外粘連蛋白 96T
TREM1 英文名稱: 髓系細胞觸發受體1 0.2ml
CRTC3 英文名稱: CREB調節轉錄激活因子3 0.2ml
cofilin 英文名稱: 絲切蛋白 0.1ml
Anti-IL-20 白細胞介素-20Multi-class antibodies規格: 0.2ml
INH(Human Inhibin) ELISA Kit 人抑制素Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Histone H2B 組蛋白H2BMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MMP-1 基質金屬蛋白酶-1 規格 0.1ml
HO-2(Human heme oxygenase 2) ELISA Kit 人血紅素氧合酶2 96T
phospho-RPS6KA1(Ser352) 英文名稱: 磷酸化絲酸/蘇酸激酶p90RSK蛋白 0.1ml