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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4332
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-09
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4332 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
羽扇豆源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | 50T | LZR4332 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
蘋(píng)果殼囊孢用途: 代謝產(chǎn)物
栗疫菌拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
霍亂弧菌拉丁屬名: Vibrio cholerae
大禿馬勃*拉丁屬名: Calvatia gigantea
繩狀籃狀菌拉丁屬名: Talaromyces funiculosus
長(zhǎng)裙竹蓀注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
嗜熱脂肪地芽孢桿菌拉丁屬名: Geobacillus stearothermophilus
雜色曲霉原變種拉丁屬名: Aspergillus versicolor var. versicolor
米曲霉拉丁屬名: Aspergillus oryzae (Ahlburg) Cohn
野土地桿菌拉丁屬名: Pedobacter agri
中瀨擲孢酵母拉丁屬名: Sporobolomyces nakasei
金黃殼囊孢菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
谷氨酸棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
大團(tuán)囊蟲(chóng)草注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
蕈狀芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
羽扇豆源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商Aromatase 英文名稱(chēng)： 芳香化酶/細(xì)胞色素P450/雌激素合成酶 0.1ml
Anti-CCRK/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞周期相關(guān)激酶IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
FE(Mouse ferritin) ELISA KIT 小鼠鐵蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD31/FITC 熒光素標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh DVL2 蓬亂蛋白2 規(guī)格 0.2ml
Rotavirus IgM 輪狀病毒 IgM(間接法二步法)
MMP19 英文名稱(chēng)： 基質(zhì)金屬蛋白酶18/19 0.2ml
CDC4 英文名稱(chēng)： 抑制因子FBW7 0.2ml
Anti-MO25 alpha/CAB39 鈣結(jié)合蛋白39Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
F X III (Human coagulation factor X III ) ELISA Kit 人凝血因子ⅩⅢMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-prox-1 prox-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HDAC12 組蛋白去乙酰化酶12 規(guī)格 0.2ml
AQP-5 ELISA Kit 大鼠水通道蛋白5 96T
PAR-2 英文名稱(chēng)： 蛋白酶激活受體-2 0.1ml
Angiotensin II Type 1 Receptor 英文名稱(chēng)： 緊張素Ⅱ-1型受體 0.1ml
Anti-5-HTR1B /FITC 熒光素標(biāo)記5-羥色胺受體1BIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
IL-17 ELISA KIT 大鼠白介素17Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-AGEs/FITC 熒光素標(biāo)記晚期糖基化終末產(chǎn)物IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FBXO38 F-box蛋白38 規(guī)格 0.2ml
Apo-H ELISA Kit 大鼠載脂蛋白H 96T
MGAT5 英文名稱(chēng)： 糖蛋白GNTVA 0.2ml
Cyclin E 英文名稱(chēng)： 周期素E 0.2ml
Anti-MOG 髓鞘少樹(shù)突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
HG(Human Herpes Gestation) ELISA Kit 人Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-AKT2 蛋白激酶B2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Headpin/SERPINB13 絲氨酸蛋白酶抑制劑13 規(guī)格 0.2ml
Alpha1-AGP(Human Alpha1-Acid glycoprotein) ELISA Kit 人α1酸性糖蛋白 96T
p47 英文名稱(chēng)： 血小板47蛋白 0.2ml
