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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4323
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-09
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4323 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
小鼠源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū) | 50T | LZR4323 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
球黑孢菌拉丁屬名: Khuskia oryzae H.J. Huds.
異常畢赤酵母拉丁屬名: Pichia anomala
蠟樣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus cereus
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen
水稻紋枯病（立枯絲核菌）拉丁屬名: Thanatephorus cucumeris
黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
阪崎氏年輕泰坦桿菌(阪崎克羅諾桿菌) 拉丁屬名: Cronobacter sakazakii
亮白曲霉拉丁屬名: Aspergillus candidus
戊糖乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus pentosus
嗜熱脂肪地球芽胞桿菌拉丁屬名: Geobacillus stearothermophilus
克魯斯假絲酵母拉丁屬名: Candida krusei
葡枝根霉拉丁屬名: Rhizopus stolonifer
臘狀芽胞桿菌用途: 產(chǎn)蛋白酶
大腸埃希菌拉丁屬名: coli
土味鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces odorifer
小鼠源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)IL-2 ELISA KIT 小鼠白介素2 96T
TSHB 英文名稱(chēng)： 小鼠抗促甲狀腺素 0.1ml
C6orf57 英文名稱(chēng)： 6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框57 0.2ml
Anti-Phospho-Met (Tyr1349) 磷酸化肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
小鼠8異素(8-iso-PG)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Mouse 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ) ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Mouse Collagen Type Ⅰ,Col ⅠELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Mouse C-telopeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
CDC16 英文名稱(chēng)： 細(xì)胞分裂周期蛋白16 0.2ml
Anti-Phospho-cdc2 (Thr14) 磷酸化周期素依賴(lài)激酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
TPO(Thyroid Peroxidase) 甲狀腺過(guò)氧化物酶(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-Phospho-cdc25C (Ser216) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25CMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh ORP8 氧化固醇結(jié)合蛋白8 規(guī)格 0.2ml
IGFBP7 Kit Human 人 IGFBP7 ELISA配對(duì) ELISA
phospho-TRIM25(Ser100) 英文名稱(chēng)： 磷酸化雌激素反應(yīng)指狀蛋白 0.1ml
PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase) 尿激酶型纖溶酶原激活因子(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-AVPR2 精氨酸加壓素受體2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-AKT2 (Ser474) 磷酸化蛋白激酶B2 規(guī)格 0.1ml
Myeloperoxidase 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
UGDH 英文名稱(chēng)： 尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶 0.2ml
DNAJC3 英文名稱(chēng)： 干擾素誘導(dǎo)蛋白p58ipk 0.1ml
Anti-AVPR2 精氨酸加壓素受體2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
CYBR1 英文名稱(chēng)： 細(xì)胞色素B還原酶1 0.2ml
Anti-Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
Human desmin,Des ELISA Kit 人結(jié)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-SSB/La 干燥癥SSB/LaMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgM/Bio 生物素標(biāo)記的羊抗人IgM 規(guī)格 0.1ml
Lp-PL-A2(Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2) ELISA Kit 小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2 96T
Proprotein Convertase 2 英文名稱(chēng)： 神經(jīng)轉(zhuǎn)化酶2 0.1ml
