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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4319
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-09
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4319 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
蝦源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū) | 50T | LZR4319 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
惡臭假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas putida
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
樟疫霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
葡萄球菌屬拉丁屬名: Staphylococcus sp.
大肥菇拉丁屬名: Agaricus bitorquis
假單胞菌屬拉丁屬名: Pseudomonas avellanae
鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces sp.
陰溝腸桿菌拉丁屬名: Enterobacter cloacae
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
血鏈球菌拉丁屬名: Streptococcus sanguinis
短裙竹蓀2-1注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
腫大地桿菌拉丁屬名: Terrabacter tumescens
白色念珠菌拉丁屬名: Candida albicans
茶盤(pán)長(zhǎng)孢*拉丁屬名: Gloeosporium theae-sinensis T. Miyake
雜色曲霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
蝦源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)Claudin 16 英文名稱： 緊密連接蛋白16 0.1ml
Anti-CTR1/Calcitonin receptor 降鈣素受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
NT-3 人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素-3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Cyclin D1 周期素D1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh NFX1 核轉(zhuǎn)錄因子X(jué)盒結(jié)合蛋白1 規(guī)格 0.2ml
Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit 人降解加速因子 96T
TNF-alpha(1F6) 英文名稱： 壞死因子-α單克隆 0.1ml
CDC10 英文名稱： 細(xì)胞周期調(diào)控因子10 0.2ml
Anti-Phospho-Torc2/Crtc2 (Ser171) 磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
REG-4(Human regenerating gene IV ) ELISA Kit 人再生基因蛋白IVMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-PAK2(Ser141) 磷酸化p21激活激酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HPCL2 植烷酰輔酶A羥化酶2 規(guī)格 0.2ml
APSA(Human Anti-phosphatidyl serine antibody) ELISA Kit 人抗磷脂酰絲酸 96T
Phospho-PKM2 (Tyr105) 英文名稱： 磷酸化酸激酶M2 0.1ml
小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)
小鼠可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)
小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)
cAMP 人環(huán)-磷酸腺苷Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CK15 細(xì)胞角蛋白15Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NSE/ENO2/γ Enolase 神經(jīng)元特異性烯醇化酶 規(guī)格 0.1ml
Freund's Adjuvant Complete 弗氏完全佐劑(美國(guó)SIGMA) 10ml
CXorf21 英文名稱： X染色體開(kāi)放閱讀框21 0.2ml
Anti-fatty acid elongase 脂肪酸延長(zhǎng)酶Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
human-VEGF-D 大鼠內(nèi)皮生長(zhǎng)因子DMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-DP-I 橋粒斑蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NARF 核纖層蛋白A識(shí)別因子 規(guī)格 0.2ml
Human coagulation factor II ,F II ELISA Kit 人凝血因子Ⅱ 96T
phospho-SLC29A4 (Tyr198) 英文名稱： 磷酸化腦質(zhì)膜單胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMAT 0.1ml
