- 品牌:聯祖
- 產地:進口、國產
- 貨號:LZR4310
- 價格: ¥3800/盒
- 發布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-01-09
產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4310 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
山羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規格 | 50T | LZR4310 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
大腸埃希菌拉丁屬名: coli
刺孢小克銀漢霉拉丁屬名: Cunninghamella echinulata
地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus licheniformis
山茶刺盤孢注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
枯草芽孢桿菌枯草亞種拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
淡紫擬青霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
耐堿刺放線孢菌拉丁屬名: Spinactinospora alkalitolerans
Bacillus tequilensis注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
粟酒裂殖酵母拉丁屬名: Schizosaccharomyces pombe
黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
乙酸鈣不動桿菌拉丁屬名: Acinetobacter calcoaceticus
大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
產氨短桿菌拉丁屬名: Brevibacterium ammoniagenes
果生鏈核盤菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
根瘤菌拉丁屬名: Rhizobium tubonense
山羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規格ARID1B 英文名稱: 基因結合蛋白ARID1B 0.2ml
Anti-WNT2B 信號通路Wnt2BMulti-class antibodies規格: 0.2ml
MPO-ANCA IgG ELISA Kit 大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質IgGMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-UCP-2 線粒體脫偶連蛋白2Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GCMA/GCM1 絨毛膜特異性轉錄因子GCMa 規格 0.2ml
SDF-1 Beta/CXCL12(Mouse Stromal cell derived factor 1 Beta) ELISA kit 小鼠基質細胞衍生因子1β 96T
NAT2 英文名稱: N-乙酰基轉移酶2 0.1ml
CD82 英文名稱: 轉移抑制蛋白1 0.1ml
Anti-Phospho-Merlin (Ser518) 磷酸化2型神經Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Gamma-ECS(Human Gamma-glutamyl systeine synthetase) ELISA Kit 人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-NR2C/NMDAR2C 谷氨酸受體2CMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IGF2BP2/IMP2 樣生長因子ⅡmRNA結合蛋白2 規格 0.2ml
IFN Alpha-Ab(Human Interferon AlphaAntibody) ELISA Kit 人抗α干擾素 96T
PGP9.5 英文名稱: 神經細胞胞漿蛋白9.5(蛋白基因產物9.5) 0.1ml
IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β(白細胞介素-1β)(多肽抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-CD184/CXC-R4 細胞表面趨化因子受體4Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PANK1 泛酸激酶1 規格 0.2ml
HSPB1 Kit Human 人 HSP27 / HSPB1 ELISA配對 ELISA
Transferrin 英文名稱: 轉鐵蛋白/血清鐵傳遞蛋白 0.1ml
Cdc25C 英文名稱: 細胞分裂周期蛋白25C 0.2ml
Anti-CD184/CXC-R4 細胞表面趨化因子受體4Multi-class antibodies規格: 0.1ml
CXCL16 英文名稱: CXC趨化因子16 0.1ml
Anti-Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型病毒血凝素Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Col III (Human Collagen Type III ) ELISA KIT 人Ⅲ型膠原Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-IFI16/p16 γ干擾素誘導蛋白16Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAP3K8/TPL2 原活化蛋白激酶激酶8 規格 0.2ml
ADH(Human alcohol dehydrogenase) ELISA Kit 人乙醇脫氫酶 96T
phospho-Ret(Tyr1062) 英文名稱: 磷酸化原癌基因酪酸蛋白激酶受體RET 0.1ml