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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4299
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4299 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
騾源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | 50T | LZR4299 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
乳酒假絲酵母拉丁屬名: Candida kefyr
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
谷氨酸棒桿菌Ⅲ型拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum Ⅲ
油葫蘆歐文氏菌拉丁屬名: Erwinia eogrylli
糞銹傘注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
Novosphingobium sp.拉丁屬名: Novosphingobium sp.
馬賽菌拉丁屬名: Massilia sp.
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
紫穗槐根瘤菌用途: 與紫穗槐共生固氮
白黃鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces alboflavus (Waksman et Curtis) Waksman et Henrici
杰丁畢赤酵母拉丁屬名: Pichia jadinii
云南紅球菌拉丁屬名: Rhodococcus yunnanensis
蘇云金芽孢桿菌馬來西亞亞種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
紫色變異鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces violovariabilis
平菇PL-27注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
騾源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書ATG9B 英文名稱： 自噬相關(guān)蛋白9B 0.2ml
Anti-Aurora A /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、、兔、馬、豬有絲分裂激酶AIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
FASL ELISA Kit 大鼠凋亡相關(guān)因子配體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-APP695/770 /FITC 熒光素標(biāo)記淀粉樣肽前體蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM46C FAM46C蛋白 規(guī)格 0.2ml
ADAMTS13/vWF-cp ELISA Kit 大鼠性因子裂解蛋白酶 96T
MTSS1 英文名稱： 轉(zhuǎn)移抑制蛋白1 0.1ml
CD63 英文名稱： 相關(guān)抗原 0.1ml
Anti-NF-L/68kDa neurofilament 低分子量神經(jīng)絲蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
GSH(Human glutathione) ELISA Kit 人谷胱甘肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MCSF Receptor 巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Jun D 活化蛋白激酶D 規(guī)格 0.1ml
ALCAM ELISA Kit 大鼠白細(xì)胞活化黏附因子 96T
PCNA(1C11) 英文名稱： 小鼠增殖細(xì)胞核抗原單克隆 0.1ml
Rhesus antibody Rh PHKG2 磷酸化酶激酶γ2 規(guī)格 0.2ml
Keratin,LMW 1:300(200) 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Unc18-3 英文名稱： 突觸囊泡融合蛋白Unc18-3 0.2ml
CATSPER2 英文名稱： 陽離子通道相關(guān)蛋白2 0.2ml
Anti-Bcl-2 Bcl-2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
DNA Ligase IV 英文名稱： DNA連接酶4 0.2ml
芳香化酶 Anti-Aromatase 0.1ml
Cullin 4B 英文名稱： CUL4B蛋白 0.1ml
Anti-LIX1 LIX1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-SIRT1/FITC 熒光素標(biāo)記沉默調(diào)節(jié)蛋白1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Bassoon(BSN) Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
軸索過度生長(zhǎng)抑制因子-A Anti-Nogo-A 0.1ml
RNF142 英文名稱： 環(huán)指蛋白142 0.2ml
protein 4.2 英文名稱： 紅細(xì)胞膜蛋白4.2 0.2ml
