產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4297 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
鹿源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 | 50T | LZR4297 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
玫瑰暗黃鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces roseofulvus
木賊鐮孢拉丁屬名: Fusarium equiseti
土壤短波單胞菌拉丁屬名: Brevundimonas terrae
球孢白僵菌用途: 生物防治
熒光假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas fluorescens
解脂假絲酵母解脂變種拉丁屬名: Candida lipolytica var. lipolytica
谷氨酸棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
微白黃鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces albidoflavus
奧斯陸莫拉氏菌拉丁屬名: Moraxella osloensis
暗產色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces phaeochromogenes
南方正青霉拉丁屬名: Penicillium meridianum
食酸戴爾福特菌拉丁屬名: Delftia acidovorans
薛瓦酵母拉丁屬名: Saccharomyces chevalieri
甜菜假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas bei
蘇云金芽胞桿菌鲇澤變種用途: 制備抗原標準菌株,毒殺鱗翅目昆蟲
鹿源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 GSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha) 葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
S100A7 S100A7 兔單抗 (FITC) Human
Rhesus antibody Rh phospho-CRK (Ser41) 磷酸化CRK 規格 0.1ml
品名 規格 備注
ZBTB38 英文名稱: 鋅指蛋白ZBTB38 0.2ml
Desmocollin 1 英文名稱: 橋粒糖蛋白1 0.1ml
S100A7 S100A7 兔單抗 (FITC) Human
CD62L 英文名稱: L選擇素 0.1ml
Anti-GABA 兔抗γ1氨基丁酸Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Fc GammaR II /CD32(Human Receptor II for the Fc region of immunoglobulin G,Fc GammaR II ) ELISA Kit 人免疫球蛋白G Fc段受體ⅡMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-FOXO1 叉頭蛋白O1Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse anti-rabbit IgG ascites 小鼠抗兔IgG腹水 規格 1ml
Beta-LPH(Human Beta-lipotropic hormone) ELISA Kit 人β-促脂素 96T
Semaphorin 5A 英文名稱: 跨膜蛋白SEMA5A 0.2ml
phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743) 英文名稱: 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白 0.1ml
Anti-ANG-2/FITC 熒光素標記生成素-2IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
AQP-1(Mouse Aquaporin 1) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白1Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-CD163/M130/FITC 熒光素標記CD163IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-human IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的驢抗人IgG 規格 0.1ml
HBsAg 表面抗原 96T
Msx2 英文名稱: 同源盒基因Msx2 0.2ml
Cullin 2 英文名稱: Cullin2 0.2ml
Anti-PCNA-Proliferation Marker 增殖細胞核抗原Multi-class antibodies規格: 0.1ml
GP-II(Human Glycogen phosphorylase II) ELISA Kit 人糖原磷酸化酶同工酶IIMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-MIF 巨噬細胞移動抑制因子Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IRAK4 白介素-1受體相關激酶4 規格 0.2ml
HBXIP(Human hepatitis B virus X interacting protein) ELISA Kit 人病毒X蛋白相互作用蛋白 96T
PCDHGA5 英文名稱: 原鈣粘蛋白γA5 0.2ml