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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
芥末源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR4293
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR4293
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

規格

貨號

芥末源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

50T

LZR4293

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:

中慢生華癸根瘤菌用途: 與沙打旺共生固氮

檸條根瘤菌用途: 與檸條共生固氮

瑞士乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus  helveticus

異常漢遜酵母拉丁屬名: Hansenula anomala

小克銀漢霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

四孢脈孢菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

豇豆慢生根瘤菌用途: 與金合歡、黑荊相思樹共生固氮

黑木耳拉丁屬名: Auricularia  auricula

賴氨酸芽孢桿菌拉丁屬名: Lysinibacillus sp.

釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

戊糖片球菌*拉丁屬名: Pediococcus pentosaceus

羅伊氏乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus  reuteri

熱噬淀粉芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  thermoamylovorans
芥末源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 Anti-HMGA1 (high mobility group AT-hook 1) 高遷移率族蛋白A1抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Anti-AAK1 AP2關聯激酶1Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-c-Jun(Thr91+Thr93) 磷酸化原癌基因c-Jun 規格 0.1ml

羊抗人IgG血清 0.5ml 國產

WNK4 英文名稱: WNK4 0.1ml

DRD3 英文名稱: 多巴胺受體D3 0.1ml

Anti-AAK1 AP2關聯激酶1Multi-class antibodies規格: 0.2ml

CD59 英文名稱: CD59 0.2ml

Anti-IAA 吲哚乙酸/植物生長素單克隆Multi-class antibodies規格: 0.2ml

AFP-L1(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 1) ELISA Kit 人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-phospho-HDAC7 (Ser318) 磷酸化組蛋白去乙酰化酶7Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh MK5/MAP2K5 原活化蛋白激酶激酶5 規格 0.1ml

AST(Human Aspartate aminotransferase) ELISA Kit 人天門冬酸基轉移酶 96T

RNF45 英文名稱: 環指蛋白45/自分泌運動因子受體 0.2ml

人凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒英文名稱:Human gelson ELISA Kit進口/分裝

PKA(Protein Kinase A) 蛋白激酶A(多肽)Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Anti-Kir6.2 ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-AKT3 (Ser472) 磷酸化蛋白激酶AKT3 規格 0.1ml

Myosin skeltal,muscle 濃縮液 0.1ml 進口分裝

Ulex Europaeus Lectin 1 英文名稱: 荊豆凝集素1 0.1ml

DACH2 英文名稱: 轉錄調節因子DACH2 0.2ml

CTRP5 英文名稱: 補體C1q和壞死因子相關蛋白5 0.2ml

Anti-P63 protein P63 抑制基因Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Human Resistin ELISA KIT 人抵抗素Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-MMP-12 基質金屬蛋白酶-12Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Integrin Alpha X/CD11c 整合素αX 規格 0.1ml

IL-11 ELISA Kit 大鼠白介素11 96T

Proteasome 20S C2 英文名稱: 蛋白酶體PSMα1 0.2ml

 


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