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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4288
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-09
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4288 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
虎源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | 50T | LZR4288 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
猴頭菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
雙色牛肝菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
長(zhǎng)雙歧桿菌*亞種拉丁屬名: Bifidobacterium longum subsp. infantis
大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
擬莖點(diǎn)霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
北見微桿菌拉丁屬名: Microbacterium kitamiense
球毛殼菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
栗疫菌拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
細(xì)極鏈格孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
胡椒樹青霉拉丁屬名: Penicillium molle
紅霉素?cái)M無枝酸菌用途: 益生菌
桑葉刺盤孢拉丁屬名: Colletotrichum morifolium Hara
金黃殼囊孢菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌拉丁屬名: Geobacillus stearothermophilus
微黃八疊球菌拉丁屬名: Sarcina subflava Ravenel
虎源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商ALF 英文名稱： 通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子 0.1ml
Anti-APP695/770 /FITC 熒光素標(biāo)記淀粉樣肽前體蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ATGA/TGAB ELISA Kit 大鼠抗甲狀腺球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Acetyl CoA Carboxylase/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、猴、乙酰輔酶A羧化酶IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FIBCD1 含纖維蛋白原C結(jié)構(gòu)域蛋白1 規(guī)格 0.2ml
NGF- Beta(Human Nerve growth factor- Beta) ELISA kit 人的神經(jīng)生長(zhǎng)因子-β 96T
Mtp53(N235K N239Y) 英文名稱： 突變型P53 0.1ml
CD5 英文名稱： CD5 0.1ml
Anti-MCSF Receptor 巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
MBP/MBL(Human Mannma binding protein/mannan binding lectin) ELISA Kit 人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-P-selectin/CD62p P選擇素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HCCR2/LETMD1 原癌基因2 規(guī)格 0.2ml
GGT(Human gamma glutamyl transpeptidase) ELISA Kit 人γ谷酰轉(zhuǎn)移酶 96T
PCNA 英文名稱： 增殖細(xì)胞核抗原 0.1ml
AVPR2 英文名稱： 精酸加壓素受體2 0.1ml
Anti-Acinus L/S/FITC 熒光素標(biāo)記腺泡Acinus L/SIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
C I CP(Mouse cross-linked C-telopeptides of Type I collagen) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CA125/Biotin 生物素標(biāo)記兔抗人CA125抗原IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh DRAK2 DAP凋亡誘導(dǎo)蛋白激酶2 規(guī)格 0.2ml
HSV- II IgG 單純Ⅱ型病毒 IgG(間接法二步法)
MTNR1B 英文名稱： 褪黑素受體1B 0.1ml
CTLA4 英文名稱： 細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗原-4 0.2ml
Anti-Protein A 重組蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LEP(Human Leptin) ELISA kit 人瘦素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
anti-Integrin alpha E2 整合素alpha E2 Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Kif14 protein 驅(qū)動(dòng)蛋白家族Member14蛋白 規(guī)格 0.2ml
CP(Human cicatricial Pemphigoid) ELISA Kit 人性天皰瘡 96T
PCMT1 英文名稱： 天門冬酸甲基轉(zhuǎn)移酶PCMT 0.2ml
