- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4286
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-01-09
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4286 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
胡蘿卜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | 50T | LZR4286 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
球孢白僵菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
極細(xì)枝孢拉丁屬名: Cladosporium tenuissimum
大腸桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
膠凍樣芽胞桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
大腸埃希菌拉丁屬名: coli
厚環(huán)粘蓋牛肝菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
燕麥鐮孢拉丁屬名: Fusarium avenaceum
裂孔平伏菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
大豆慢生根瘤菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
蠟狀芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus cereus
小孢根霉寡孢變種拉丁屬名: Rhizopus microsporus var. oligosporus
猴頭菇注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
薄層菌屬拉丁屬名: Hymenobacter sp.
郎伍德鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces longwoodensis
胡蘿卜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Cardiac FABP 英文名稱: 脂肪酸結(jié)合蛋白3 0.1ml
Anti-Integrin beta 2/CD18/LFA-1 整合素β2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
XIAP(X-linked Inhibitor of Apoptosis Protein) X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Alpha-Catenin α-連環(huán)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PCDHGC3/PCDH2 原鈣粘蛋白γC3 規(guī)格 0.2ml
FLT4 Kit Human 人 VEGFR3 / FLT4 ELISA配對 ELISA
TNFSF13 英文名稱: 壞死因子配體超家族成員13 0.2ml
CD46 英文名稱: 膜輔蛋白 0.2ml
Anti-NFKB p52/NF-κB2 p100 細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ADH/VP/AVP(Human antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin) ELISA Kit 人抗激素/加壓素/精氨酸加壓素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Leptin 瘦素Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KMT1C/G9a 組蛋白H3賴氨酸9甲基化1C 規(guī)格 0.2ml
RLN(Human Relaxin) ELISA Kit 人松弛肽/松弛素 96T
Phospho-PLC gamma 1(Ser1248) 英文名稱: 磷酸化磷酯酶Cγ1 0.1ml
phospho-APC1 (Ser355) 英文名稱: 磷酸化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1 0.1ml
Anti-Annexin I/FITC 熒光素標(biāo)記人、大、小鼠膜粘連蛋白 IIgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ALD ELISA Kit 大鼠醛固酮Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ASCL1/MASH1 /FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)母細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移因子IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM123B/AMER1 腎母細(xì)胞瘤X蛋白 規(guī)格 0.2ml
MBP ELISA Kit 大鼠主要堿性蛋白 96T
MOG 英文名稱: 髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白 0.1ml
Ctip2 英文名稱: B淋巴細(xì)胞/11B 0.2ml
Anti-L-Citrulline L-瓜氨酸Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2mg
C3c(Human Complement fragment 3c) ELISA Kit 人補(bǔ)體片段3cMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-RRM1 核糖核苷酸還原酶1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HDAC6 組蛋白去乙酰化酶6 規(guī)格 0.1ml
Beta Manase(Mouse Beta mannosidase) ELISA Kit 小鼠β甘露糖苷酶 96T
PAX9 英文名稱: 配對盒基因9 0.1ml