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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4282
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-09
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4282 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
核桃源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | 50T | LZR4282 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
球孢白僵菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
嗜鐵鉤端螺菌拉丁屬名: Leptospirillum ferriphilum
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
淡紫擬青霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
植物乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
假單胞菌用途: 成膜菌
芽孢桿菌屬拉丁屬名: Bacillus sp.
栗疫菌拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
草木樨中華根瘤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
云芝*拉丁屬名: Coriolus Versicolor (L.:Fr.) Quel
蘇云金芽胞桿菌用途: 科研研究
嗜水氣單孢菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
巴氏醋桿菌拉丁屬名: Acetobacter pasteurianus
核桃源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Rhesus antibody Rh Orexin-A 增食欲素A/欲激素A 規(guī)格 0.1ml
CD300C Kit Human 人 CD300C ELISA配對 ELISA
TRAF4 英文名稱： 壞死因子受體相關(guān)蛋白4 0.1ml
C1orf98 英文名稱： 1號染色體開放閱讀框98 0.2ml
Anti-CD337/NKp30/NCR3 細(xì)胞毒性受體NK-p30Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
魚促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒英文名稱：ACTH ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
魚骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒英文名稱：Fish Oste ocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
CD45 英文名稱： 白細(xì)胞共同抗原 0.1ml
Anti-Inhibin beta B 抑制素βBMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
pANCA(Human Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 人抗中性粒細(xì)胞核周Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Inhibin Beta C 抑制素βCMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LMP7 低分子量蛋白7 規(guī)格 0.2ml
SEP1(Human selenoprotein 1) ELISA Kit 人硒蛋白1 96T
phospho-Rb (Ser249) 英文名稱： 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1 0.1ml
豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒英文名稱：Porcine Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit進(jìn)口/分裝
豬組織因子(TF)ELISA試劑盒英文名稱：Porcine Tissue factor,TF ELISA Kit進(jìn)口/原裝
SREBP-1(Sterol Regulatory Element Binding Protein-1) 固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-Phospho-A Raf (Tyr301/302) 磷酸化A-RafMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Perilipin A 脂滴包被蛋白Perilipin-A 規(guī)格 0.1ml
CEA 癌胚抗原 1:150 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
TORC1 英文名稱： 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1 0.2ml
CTH 英文名稱： 胱硫醚γ裂解酶 0.2ml
Anti-NPY 神經(jīng)肽YMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
RTKs(Human receptor tyrosine kinase) ELISA Kit 人受體酪氨酸激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Phospho-NPM (Thr199) 磷酸化核仁磷酸蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IGSF2/CD101 CD101 規(guī)格 0.2ml
INH-BGnRH(Mouse inhibin B) ELISA Kit 小鼠抑制素B 96T
phospho-PRKCB(Ser642) 英文名稱： 磷酸化蛋白激酶C 0.1ml
