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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4269
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-09
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4269 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
豹源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 | 50T | LZR4269 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
擬青霉拉丁屬名: Paecilomyces sp.
香菇用途: 食用
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
燼灰鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces cinereogriseus (krainsky ss Krassilnikov) Yan et al.
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
淺玫瑰鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces roseolus
干草鞘氨單胞菌拉丁屬名: Sphingomonas faeni
金黑小單孢菌拉丁屬名: Micromonospora auratinigra
注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
米曲霉拉丁屬名: Aspergillus oryzae
*紅城紅球菌用途: 石油降解菌
產(chǎn)二素鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces ambofaciens
鏈格孢 蘋果專化型注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
玉米大斑病菌拉丁屬名: Setosphaeria tuicicum
尖孢鐮孢拉丁屬名: Fusarium oxysporum
豹源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-Angiopoietin 2 生成素2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Beta-Catenin(Ser45) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白 規(guī)格 0.1ml
單組分TMB底物液 12ml/100ml 進(jìn)口分裝
VSIG4 英文名稱： T淋巴細(xì)胞負(fù)調(diào)節(jié)蛋白 0.1ml
DLGAP2 英文名稱： PSD95結(jié)合蛋白2 0.2ml
Anti-Angiopoietin 2 生成素2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
CD4 英文名稱： CD4 0.1ml
Anti-Insulin (pig) (豬)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Bcl-2(Human B-cell leukemia/lymphoma 2) ELISA Kit 人B細(xì)胞因子2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Gst P1/GST class-pi 谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi基因Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MeCP2 甲基化CpG結(jié)合蛋白2 規(guī)格 0.1ml
pERK(Human phospho-extracellular signal-regulated kinase) ELISA Kit 人磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶 96T
RIPK-1 英文名稱： 絲酸蘇酸激酶1受體相互作用蛋白 0.1ml
尿酸鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1 Anti-OAT4L/URAT1 0.1ml
Anti-Phospho-Smad2 (Ser245/250/255)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-NPM (Thr95) 磷酸化核仁磷酸蛋白 規(guī)格 0.1ml
AEG-1 peptide AEG-1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
人克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒 英文名稱：Human Clara cell protein,CC16 ELISA Kit 特價(jià)促銷
人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒英文名稱：Human Campylobacter Jejuni PEB1 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人空泡毒素相關(guān)蛋白A(VacA)ELISA試劑盒英文名稱：Human Vacuolating cytotoxin A,VacA ELISA Kit特價(jià)促銷
CT74 英文名稱： /抗原74 0.2ml
Anti-phospho-p38(Thr180/Tyr182) 磷酸化-原活化蛋白激酶p38Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
HDV IgG(Human Hepatitis D virus IgG) ELISA Kit 人IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Ku-80 DNA修復(fù)酶Ku-80Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Laminin 1+2 層粘連蛋白1+2 規(guī)格 0.1ml
GR- Alpha(Human glucocorticoid receptor- Alpha) ELISA Kit 人糖皮質(zhì)激素受體α 96T
PTBP1 英文名稱： 核糖核酸結(jié)合蛋白1 0.2ml
