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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
鵪鶉源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR4267
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR4267
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

鵪鶉源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書


LZR4267


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

金黃弗拉特氏菌拉丁屬名: Frateuria aurantia

圍小叢殼注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

雕刻擬盤多毛孢拉丁屬名: Pestalotiopsis carveri

奇異球菌屬拉丁屬名: Deinococcus  sp.

海水甲基桿菌拉丁屬名: Methylobacterium salsuginis

高盧蜜環(huán)菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

千葉鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces chibaensis

釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

郝氏鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces halstedii

香菇8注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

松杉靈芝拉丁屬名: Ganoderma tsugae Murrill

苜蓿中華根瘤菌用途: 與苜蓿結(jié)瘤固氮效果很好

刺芹側(cè)耳注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

假堅強芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus pseudofirmus

鏈霉菌用途: 產(chǎn)抗菌素
鵪鶉源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Anti-Phospho-TAK1 (Thr187)/FITC 熒光素標記磷酸化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶1IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MK1/MAP2K1(Thr386) 磷酸化原活化蛋白激酶1 規(guī)格 0.1ml

Apo J/Clusterin- Alpha/ Beta(Apolipoprotein J) 凝聚素α/β抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

人大腸菌素(colicin)ELISA試劑盒英文名稱:human colicin ELISA Kit進口/原裝

人大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒英文名稱:Human Big Endothelin,Big ET ELISA Kit特價供應(yīng)

人大皰性類天皰瘡(BP)ELISA試劑盒英文名稱:Human Bullous Pemphigoid,BP ELISA Kit進口/原裝

人單胺氧化酶(MAO)ELISA試劑盒英文名稱:Human monoamine oxidase,MAO ELISA Kit特價供應(yīng)

CD3E 英文名稱: CD3/CD3-ε  0.1ml

Anti-IGF II/IGF2 樣生長因子-IIMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

THAA(Human thyroid hormone autoantibodies) ELISA Kit 人甲狀腺非肽激素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-IGF1R/CD221 樣生長因子1受體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mammaglobin A 珠蛋白1 規(guī)格 0.2ml

BMPR- II (Human Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit 人骨成型蛋白受體Ⅱ 96T

RERE 英文名稱: 肌相關(guān)蛋白1 0.2ml

顆粒蛋白前體 Anti-PGRN 0.1ml

Anti-STAT2/FITC 熒光素標記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2(STAT2)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MyoD1(Ser200) 磷酸化肌原調(diào)節(jié)蛋白 規(guī)格 0.1ml

GFRAlpha-1(GDNF family receptor alpha-1) GDNF家族受體α-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

人乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒英文名稱:Human aldehyde dehydrogenase,ALDH ELISA Kit特價促銷

人乙酰膽堿(ACH)ELISA試劑盒英文名稱:Human acetylcholine,ACH ELISA Kit特價供應(yīng)

人乙酰膽堿受體(AChRab)ELISA試劑盒英文名稱:Human acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit 進口/分裝

CT26 英文名稱: /抗原26 0.2ml

Anti-PCNA-Proliferation Marker 增殖細胞核抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

PSA-U S(Human Ultra Sensitive Prostate Specific Antigen) ELISA Kit 人超敏特異性抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Leptin receptor(L/M/S) 瘦素受體(長、中、短型)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh KLLN Killin-p53調(diào)節(jié)復(fù)制抑制蛋白 規(guī)格 0.2ml

Human Pancreastatin ELISA Kit 人胰抑制素 96T

Plasminogen 英文名稱: 纖維蛋白溶酶原 0.1ml

 


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