- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4265
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4265 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
柑橘黃龍病菌亞洲種探針法熒光定量PCR試劑盒 | Candidatus Liberibacter asiaticus | LZR4265 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
惡臭假單胞菌用途: 分類、研究,具有處理養(yǎng)殖廢水潛力。
灰綠鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces griseoviridis
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
近平滑假絲酵母注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
鏈霉菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
蘇云金芽胞桿菌用途: 科研研究
雞傷寒沙門氏菌拉丁屬名: gallinarum
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
杉葉散斑殼(都不提供)拉丁屬名: Lophodermium uncinatum Darker
間型假絲酵母拉丁屬名: Candida intermedia
突尼斯葉桿菌拉丁屬名: Phyllobacterium ifriqiyense
大豆慢生根瘤菌用途: 與大豆共生固氮,培養(yǎng)基pH4.3生長
康寧木霉拉丁屬名: Trichoderma koningii
鏈霉菌用途: 產(chǎn)抗菌素
彩色豆馬勃注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
柑橘黃龍病菌亞洲種探針法熒光定量PCR試劑盒 人多肽YY(Peptide-YY)ELISA試劑盒英文名稱:Human Peptide YY ELISA Kit特價供應(yīng)
人多效生長因子(PTN)ELISA試劑盒英文名稱:Human pleiotrophin,PTN ELISA Kit特價供應(yīng)
人多形核白細(xì)胞彈性蛋白酶(PMN Elastase)ELISA試劑盒英文名稱:Human Polymorphonuclear Elastase,PMN Elastase ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)ELISA試劑盒英文名稱:Human multidrug resistance-associated protein,MRP ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒英文名稱:Human catecholamine,CA ELISA Kit特價供應(yīng)
Matriptase 蛋白裂解酶(一種新的癌基因)抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-AMPK alpha 2 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CD39 英文名稱: CD39 0.2ml
Anti-Phospho-Histone H3 (Ser28) 磷酸化組蛋白3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Beta2-GP1 IgA/G/M(Human Beta2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M) ELISA Kit 人β2糖蛋白1IgA/G/MMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-rInsulin monoclonal (pig) 抗單克隆(豬)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh LMO2 T淋巴細(xì)胞易位蛋白2 規(guī)格 0.2ml
CysLTs(Human cysteinyl leukotrienes) ELISA Kit 人半胱酰白三烯 96T
REA 英文名稱: B淋巴細(xì)胞受體相關(guān)蛋白 0.2ml
大鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒英文名稱:Rat interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit特價供應(yīng)
大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA Kit特價促銷
大鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISA Kit進(jìn)口/分裝
FGF5 peptide 纖維母細(xì)胞生長因子5抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
B Raf Anti-B Raf 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-DVL2(Thr224) 磷酸化蓬亂蛋白2 規(guī)格 0.1ml
纖維素膜(30cm×3m 0.45um) 1卷 Pall-Gelman
CSTP1 英文名稱: 鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶CSTP1 0.2ml
Anti-FSH receptor 促卵泡刺激素受體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
HLA-G 大鼠白細(xì)胞抗原GMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Dysferlin Dysferlin蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NANOS2 細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白NANOS2 規(guī)格 0.2ml
Human thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit 人血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1 96T
SMYD2 英文名稱: 組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶SMYD2 0.2ml