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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
耶爾森菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR4260
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR4260
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

耶爾森菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商

Yersinia spp.

LZR4260


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

熱帶假絲酵母拉丁屬名: Candida  tropicalis

大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli

枯草芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

克雷伯氏菌亞種拉丁屬名: Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae

肉糜  馬源性成分(定性)拉丁屬名: 肉糜  馬源性成分(定性)

中國漢納酵母乳酸變種拉丁屬名: Hannaella sinensis var. lactis

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

特異腐質(zhì)霉拉丁屬名: Humicola insolens

大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli

曲霉拉丁屬名: Aspergillus sp.

Thielavia 拉丁屬名: Thielavia

泗川類芽孢桿菌拉丁屬名: Paenibacillus sacheonensis

壁芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus muralis

蠟蚧菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

蠟樣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  cereus
耶爾森菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商Rhesus antibody Rh phospho-MAPKAPK5(Ser93) 磷酸化p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激酶 規(guī)格 0.1ml

ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2) P53凋亡刺激蛋白2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

人素A2(TX-A2)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Thromboxane A2,TX-A2 ELISA Kit進(jìn)口/原裝

人素B2(TXB2)ELISA試劑盒英文名稱:Human Thromboxane B2,TX-B2 ELISA Kit進(jìn)口/分裝

人調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒英文名稱:Human thrombomodulin,TM ELISA Kit 特價促銷

人血吸蟲(schistosoma)ELISA試劑盒英文名稱:human schistosoma ELISA Kit特價促銷

人血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒英文名稱:Human Fibrinogen,Fbg ELISA Kit特價促銷

CD35 英文名稱: Ⅰ型補(bǔ)體受體(C3b/C4b受體) 0.1ml

Anti-MMP-9 基質(zhì)金屬蛋白酶-9Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Casp-12(Human Caspase 12) ELISA Kit 人胱天蛋白酶12Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Nox1/NADPH oxidase 1 有絲分裂氧化酶1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh IL-9 白介素9 規(guī)格 0.1ml

PR3 Ab-IgG(Human Anti-proteinase 3 antibody IgG) ELISA Kit 人抗蛋白酶3IgG 96T

PLGF 英文名稱: 胎盤生長因子 0.1ml

Desmoglein 1 英文名稱: 橋粒芯糖蛋白1 0.1ml

PVR CD155 / PVR 鼠單抗 (PE) Human

EFHA1 英文名稱: EFHA1蛋白 0.1ml

RhoA Anti-RhoA 0.1ml

Anti-TACR3/NK-3 receptor /FITC 熒光素標(biāo)記速激肽受體3IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MK2(Thr394) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶2 規(guī)格 0.1ml

Apelin 脂肪因子Apelin抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

CSPP1 英文名稱: 中心體和紡錘體極相關(guān)蛋白1 0.1ml

Anti-FGF3/Oncogene INT2 纖維母細(xì)胞生長因子3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

EGFR 小鼠表皮生長因子受體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-ATEXPA10 植物延長蛋白(擬南芥)Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml

Rhesus antibody Rh MRP5/ABCC5 多藥耐藥相關(guān)蛋白5 規(guī)格 0.1ml

anti-CMV IgM(Human anti-cytomegalovirus IgM antibody) ELISA Kit 人抗巨細(xì)胞病毒IgM 96T

Sclerostin 英文名稱: 骨形態(tài)發(fā)生抑制蛋白SOST 0.2ml

 


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