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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4258
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4258 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
假結(jié)核耶爾森菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Yersinia pseudotuberculosis | LZR4258 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
蘇云金芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus thuringiensis Berliner
大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
根瘤菌用途: 與小冠花共生固氮，1983年開始在陜西應(yīng)用
矩圓黑盤孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
宛氏擬青霉拉丁屬名: Paecilomyces variotii
壁芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus muralis
黃綠木霉拉丁屬名: Trichoderma aureoviride
球黑孢霉拉丁屬名: Nigrospora sphaerica
乳酒假絲酵母拉丁屬名: Candida kefyr
谷氨酸棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
熱灰鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces thermogriseus
果生鏈核盤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
五原假黃單胞菌拉丁屬名: Pseudoxanthomonas wuyuanensis
運(yùn)動(dòng)替斯崔納菌拉丁屬名: Tistrella mobilis
假結(jié)核耶爾森菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Emp1 (epithelial membrane protein 1) 表皮膜蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml
鈣離子ATP酶通道蛋白 Anti-ATP2c1/Ca++ ATPase 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-EGFR(Ser991) 磷酸化表皮生長因子受體 規(guī)格 0.1ml
D-Hanks緩沖液(HBSS) 250ml 國產(chǎn)
ZNF217 英文名稱： 鋅指蛋白217 0.2ml
DLX4 英文名稱： DLX4 0.2ml
鈣離子ATP酶通道蛋白 Anti-ATP2c1/Ca++ ATPase 0.1ml
CD34 英文名稱： CD34 0.1ml
Anti-Phospho-EphA2 (Tyr594) 磷酸化酪氨酸蛋白激酶A2受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
IL-15 小鼠白介素-15Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Phospho-MK1/2 (Ser217/221) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶1/2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MTM1/Myotubularin 肌微管素1 規(guī)格 0.2ml
A Beta1-42(Human amyloid beta peptide 1-42) ELISA Kit 人β淀粉樣蛋白1-42 96T
SLC34A2 英文名稱： 磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 0.1ml
蓖麻凝集素(RCA)ELISA試劑盒 英文名稱：Ricinus communis agglutinin,RCA ELISA Kit特價(jià)促銷
扁豆凝集素(LCA)ELISA試劑盒 英文名稱：Lens culinaris agglutinin,LCA ELISA Kit進(jìn)口/原裝
菜豆凝集素(PHA)ELISA試劑盒 英文名稱：Phaseolus vulgaris agglutinin,PHA ELISA Kit進(jìn)口/分裝
Cav-1 ELISA Kit 大鼠窖蛋白Caveolin1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Aurora B/FITC 熒光素標(biāo)記極光激酶BIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EXTL 外生性骨疣樣蛋白2 規(guī)格 0.2ml
L-LDH ELISA Kit 大鼠L-鼠乳酸脫氫酶 96T
CSNK1D 英文名稱： 酪蛋白激酶δ1 0.2ml
Anti-ER-Beta 雌激素受體βMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
EPO 小鼠促紅細(xì)胞生成素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-FGFR3/CD333 成纖維細(xì)胞生長因子受體3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格 0.1ml
ATF-1(Human activating transcription factor-1) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)錄因子-1 96T
STK33 英文名稱： 絲酸/蘇酸激酶33 0.2ml
