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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
酵母菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR4255
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR4255
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

酵母菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Yeast

LZR4255


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

褐球固氮菌拉丁屬名: Azotobacter  chroococcum

藍色犁頭霉拉丁屬名: Absidia caerulea

蘋果雙殼菌*注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

火木層孔菌拉丁屬名: Phellinus igniarius

暗色擬莖點霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

美澳型核果褐腐病菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

巨型艾美耳球蟲拉丁屬名: maxima

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

黃硬皮馬勃注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

土曲霉拉丁屬名: Aspergillus terreus

泥生刺囊殼拉丁屬名: Ascotricha sedimenticola

光帽鱗傘(滑菇)拉丁屬名: Pholiota nameko

黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger

綠針假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas chlororaphis
酵母菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Rhesus antibody Rh PDCD6/ALG2 凋亡相關蛋白6 規格 0.2ml

MICB Kit Human 人 MICB / MIC-B ELISA配對 ELISA

Transportin 1 英文名稱: 轉運蛋白1 0.2ml

C4 binding protein 英文名稱: 補體4結合蛋白 0.2ml

Anti-CA I 碳酸酐酶1Multi-class antibodies規格: 0.2ml

小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA Kit 特價供應

小鼠氧化(OLAb)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit特價促銷

CD33 英文名稱: CD33 0.2ml

Anti-IL-22 白介素-22Multi-class antibodies規格: 0.2ml

MOG ELISA Kit (human) 抗髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白(人)Multi-class antibodies規格: 96T

Anti-IL-21R 白介素21受體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh LRRTM1 富含亮氨酸重復跨膜神經元蛋白1 規格 0.2ml

BMP-6(Human Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit 人骨形成蛋白6 96T

phospho-ROCK2(Thr249) 英文名稱: 磷酸化Rho相關蛋白激酶2 0.1ml

腦鈉素/利鈉肽 Anti-BNP 0.1ml

ERCC6L 英文名稱: 發育相關蛋白ERCC6L(乙醇致畸因子) 0.2ml

一種抑制基因 Anti-PTEN/MMAC1 0.1ml

Anti- Alpha-Synuclein/FITC 熒光素標記核突觸蛋白-αIgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Met(Tyr1234/1235) 磷酸化肝細胞生長因子受體(原癌基因) 規格 0.1ml

HIV gp120 病毒(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg

大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Caspase 3,Casp-3 ELISA Kit特價促銷

CSMD3 英文名稱: CSMD3蛋白 0.2ml

Anti-Follistatin 卵泡抑素Multi-class antibodies規格: 0.2ml

TGF Beta2(Human transforming growth factors Beta2) ELISA Kit 人轉化生長因子β2Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-FSP/Spastin 纖維母細胞表面蛋白Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的小鼠抗人IgM 規格 0.1ml

IRAP(Human ICE protease-activating factor) ELISA Kit 人ICE蛋白酶激活因子 96T

SLITRK5 英文名稱: 神經突觸相關蛋白SLITRK5 0.2ml

 


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