產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4241 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
蛤弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Vibrio tapetis | LZR4241 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
豬鏈球菌拉丁屬名: suis
假單胞菌用途: 微生物肥料
橡膠疫霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus licheniformis
克魯維尼爾巴克利酵母拉丁屬名: Buckleyzyma kluyveri-nielii
非洲黑蛋巢拉丁屬名: Cyathus africanus
南極類芽孢桿菌拉丁屬名: Paenibacillus antarcticus
大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
海洋伍斯菌拉丁屬名: Woeseia oceanium
淡紫褐鏈霉菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
七角井鹽單胞菌拉丁屬名: Halomonas ?qijiaojingensis
靈芝拉丁屬名: Ganoderma lucidum
果生鏈核盤菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
德里腐霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
米曲霉拉丁屬名: Aspergillus oryzae
蛤弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒 人干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒英文名稱:Human Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA Kit 特價供應
人干細胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒英文名稱:Human Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISA Kit 特價供應
人剛地弓形蟲(T.gondii)ELISA試劑盒英文名稱:Human Toxoplasma Gondii,T.gondii ELISA Kit特價供應
Mcl-1(myeloid cell leukemia 1) peptide 髓樣細胞-1抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-phospho-AMPK beta 1(Ser182) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-B-Raf (Ser444) 磷酸化B-Raf 規格 0.1ml
Tris- HCl-TWEEN 20緩沖液 100ml 0.5mol/L pH7.6
CD244 英文名稱: CD244 0.2ml
Anti-phospho-IKB alpha (Ser32/36) 磷酸化IKB alpha(Ser32/36)Multi-class antibodies規格: 0.1ml
MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Beta) ELISA kit 人巨噬細胞炎性蛋白3βMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-GP65/SDFR1/NPTN 間質細胞衍化因子受體1Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Bov IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的小鼠抗IgG 規格 0.1ml
AT2R(Human Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit 人緊張素Ⅱ受體2 96T
RBBP6 英文名稱: 視網膜母細胞瘤結合蛋白6 0.1ml
大鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Estradiol,E2 ELISA Kit特價供應
FOXF1(Forkhead box protein F1) 叉頭蛋白F1抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
ALDH7A1 ALDH7A1 兔單抗 (FITC) Human
Rhesus antibody Rh phospho-Dnmt1(Tyr399) 磷酸化DNA甲基轉移酶1 規格 0.1ml
BCIP/NBT顯色試劑盒 50ml
ZNF471 英文名稱: 鋅指蛋白471 0.2ml
DKK2 英文名稱: Wnt通路抑制因子2 0.2ml
CRR9 英文名稱: 順氯鉑耐藥相關蛋白9 0.2ml
Anti-EGF 表皮生長因子Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Anti-BGP/FITC 熒光素標記骨保護蛋白/骨鈣素IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-GLUT2/FITC 熒光素標記葡萄糖轉運蛋白2IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CK3 細胞角蛋白3 規格 0.1ml
CULLIN (Cdc53/CUL) 0.5mg
SOX13 英文名稱: 胰島細胞抗原12/核轉錄因子SOX13 0.2ml