- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4223
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4223 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
耐萬古霉素腸球菌/雙重探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Vancomycin-Resistant Enterococcus(VRE)vanA/vanB | LZR4223 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
枯草芽孢桿菌fT4 (Free Thyroxine) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
漢遜德巴利酵母FSH (Follicle Stimulating Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Debaryomyces hansenii
蜻蜓蟲草GC (Glucagon) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
松口蘑(可訂購)GnRH (Gonadotropin-Releasing Hormone) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
Bacillus methylotrophicusGCP-2 (Granulocyte Chemotactic Protein 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
猴頭HSP-27 (Heat Shock Protein 27) ELISA Kit用途: 試驗(yàn)栽培
多主葡萄殼菌HSP-40 (Heat Shock Protein 40) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
葡萄座腔菌HSP-60 (Heat Shock Protein 60) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
糙皮側(cè)耳HSP-70 (Heat Shock Protein 70) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus ostreatus
變平滑假絲酵母HSP-90 (Heat Shock Protein 90) ELISA Kit拉丁屬名: Candida metapsilosis
*灰葡萄孢HSP GP96 (Heat Shock Protein Glycoprotein 96) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
枯草芽胞桿菌HGF (Hepatocyte Growth Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
考克氏菌屬Hepc (Hepcidin) ELISA Kit 拉丁屬名: Kocuria sp.
水稻節(jié)桿菌hs-CRP (High Sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter oryzae
果生鏈核盤菌HIF-1α (Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
耐萬古霉素腸球菌/雙重探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Anti-STK/CK I Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記屬絲/蘇氨酸蛋白質(zhì)激酶IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MST1R(Tyr1353) 磷酸化原癌基因c-Met相關(guān)酪氨酸激酶 規(guī)格 0.1ml
GLP-2(Glucagon-like peptide-2) 胰素樣肽-2(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人受磷蛋白(PLN)ELISA試劑盒英文名稱:Human phospholamban,PLN ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人受體TNFRSF結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2(RIPK2)ELISA試劑盒英文名稱:human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2,RIPK2 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人受體酪氨酸激酶(RTKs)ELISA試劑盒 英文名稱:Human receptor tyrosine kinase,RTKs ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人瘦素(LEP)ELISA試劑盒英文名稱:Human Leptin,LEP ELISA Kit 特價(jià)促銷
CD168 英文名稱: 透明質(zhì)酸介導(dǎo)細(xì)胞游走受體 0.1ml
Anti-Phospho-MARCKS (Ser162) 磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物MarcksMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
ILK-1(Human integrin-linked kinase 1) ELISA Kit 人整合素連接激酶1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-NDRG1 (Ser330) 磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-4 (human) 白介素4(人) 規(guī)格 0.1ml
aPT1/aPT2(Human anti-prothrombins antibodies) ELISA Kit 人抗凝血素 96T
PRDM2 英文名稱: 鋅指蛋白R(shí)IZ1 0.1ml
HSP47(Heat shock protein-47) 熱休克蛋白-47抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-phospho-c-Abl(Tyr245) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-AblMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-CHEK1 (Ser296) 磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶1 規(guī)格 0.1ml
兔抗人IgG-F(ab)2 0.5ml 國產(chǎn)
WD SOCS box protein 2 英文名稱: 信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白WD重復(fù)蛋白2 0.2ml
Phospho-Dab1 (Tyr220) 英文名稱: 磷酸化Disabled 1 0.1ml
Anti-phospho-c-Abl(Tyr245) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-AblMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
CRHR2 英文名稱: 促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體2 0.2ml
Anti-GRK2/BARK1 G蛋白偶合受體激酶2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
OSM(Human Oncostatin-M) ELISA KIT 人抑瘤素MMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-HPV 人類狀瘤病毒Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MCK10/CD167a/DDR1 神經(jīng)上皮酪氨酸激酶(癌激酶10) 規(guī)格 0.1ml
TdT(Human terminal deoxynucleotidyl transferase) ELISA Kit 人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶 96T
RNF138 英文名稱: 環(huán)指蛋白138 0.2ml